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  本文關鍵詞：天麻素與寧動顆粒對Tourette綜合征大鼠紋狀體多巴胺雙向調(diào)節(jié)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學》 2015年

天麻素與寧動顆粒對Tourette綜合征大鼠紋狀體多巴胺雙向調(diào)節(jié)作用的研究

張峰  

【摘要】：目的探討天麻素(Gastrodin, Gas)對Tourette綜合征(Tourette's syndrome, TS)模型大鼠紋狀體細胞外液多巴胺(Dopamine, DA)濃度的調(diào)節(jié)作用,并通過對紋狀體細胞外液高香草酸(Homovanillic Acid, HVA)濃度以及紋狀體多巴胺轉運體(Dopamine Transporter, DAT)的檢測,進一步明確天麻素對DA調(diào)節(jié)作用的分子作用機制。方法70只雄性Wistar大鼠隨機分為3組,分別予以腹腔注射：空白對照組(10只),腹腔注射生理鹽水5 ml/kg/d;阿樸嗎啡(Apomorphine, Apo)誘導模型組(30只),腹腔注射Apo 2 mg/kg/d;亞氨基二丙腈(3,3'-Iminodipropionitrile,IDPN)誘導模型組(30只),腹腔注射IDPN 150mg/kg/d。每日上午9：00進行造模干預,連續(xù)注射7天。后Apo造模繼續(xù),將Apo誘導模型組進一步劃分3組,分別進行藥物治療：Apo模型組(10只),生理鹽水10ml/kg/d灌胃；Apo+Gas組(10只),天麻素20mg/kg/d灌胃；Apo+Hal組(10只),氟哌啶醇(Haloperidol, Hal) 1.0 mg/kg/d灌胃。IDPN誘導模型組進一步劃分3組,分別給予藥物干預：IDPN模型組(10只),生理鹽水10ml/kg/d灌胃；IDPN+ Gas組(10只),天麻素20 mg/kg/d灌胃；IDPN+Hal組(10只),Hal 1.0 mg/kg/d灌胃�？瞻讓φ战M(10只)予生理鹽水10 ml/kg/d灌胃。每日上午9：00 Apo造模干預(共持續(xù)3周),下午2：00藥物灌胃治療(共持續(xù)8周)。Apo及IDPN造模開始后,每隔7天對大鼠的刻板行為進行一次行為學評價。灌胃治療結束后,處死各組大鼠,快速分離出紋狀體,后分別應用微透析技術(Microdialysis)及高效液相色譜技術(High-performance liquid chromatography, HPLC)測定各組大鼠紋狀體細胞外液的DA濃度,蛋白質免疫印跡技術(Western-blot)測定大鼠紋狀體DAT的蛋白表達。結果1.大鼠刻板運動的行為學評價重復測量性方差分析顯示,Apo及IDPN誘導的TS模型大鼠均表現(xiàn)出明顯的組間效應(Apo誘導模型組：F2,27=28.91,p0.01；IDPN誘導模型組：F2,27=50.81,p0.01)。與空白對照組相比,腹腔注射Apo和IDPN均可誘導大鼠產(chǎn)生明顯的刻板行為(Apo誘導模型組：p0.01；IDPN誘導模型組：p0.01)。給予藥物治療后,與Apo模型組及IDPN模型組對比,統(tǒng)計結果顯示,天麻素和Hal均可明顯減輕兩種造模藥誘發(fā)的刻板運動(Apo+Gas組 vs Apo+saline組,p0.01,IDPN+Gas組 vs IDPN+saline組,p0.01：Apo+Hal組 vs Apo+saline組,p0.01,IDPN+Hal組 vs IDPN+saline組,p0.01)。2.天麻素對大鼠紋狀體細胞外液DA濃度的影響方差分析顯示,Apo誘導模型組與IDPN誘導模型組均有明顯的組間效應(Apo誘導模型組：F3,36=5.68,p0.01；IDPN誘導模型組：F3,36=51.84,p0.01)。統(tǒng)計結果表明,Apo與IDPN對大鼠紋狀體細胞外液DA濃度的作用截然相反：Apo可明顯升高大鼠紋狀體細胞外液的DA濃度：而IDPN則使紋狀體細胞外液DA濃度明顯降低。分別給予藥物治療后,結果顯示,天麻素可顯著降低Apo誘導升高的大鼠紋狀體細胞外液的DA濃度,同時顯著升高IDPN誘導降低的紋狀體細胞外液DA濃度。換言之,對異常升高或降低的紋狀體細胞外液DA濃度,天麻素均具有對其進行調(diào)節(jié)、使之趨向于正常的作用。與天麻素的良性調(diào)節(jié)作用不同,Hal對于Apo以及IDPN誘導產(chǎn)生的異常的紋狀體細胞外液DA濃度,均未表現(xiàn)出明顯的干預作用。3.天麻素對大鼠紋狀體細胞外液HVA濃度的影響兩種造模干預藥物,Apo及IDPN均未對大鼠紋狀體細胞外液HVA濃度產(chǎn)生明顯影響(Apo誘導模型組：p0.05；IDPN誘導模型組：p0.05)。分別給予藥物治療后,統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,天麻素與Hal亦未對兩種TS模型大鼠紋狀體細胞外液HVA濃度產(chǎn)生明顯的調(diào)節(jié)作用。4.天麻素大鼠紋狀體DAT表達的影響方差分析顯示,Apo誘導模型組與IDPN誘導模型組均有明顯的組間效應(Apo誘導模型組：F3,36=10.92,p0.01；IDPN誘導模型組：F3,36=21.15,p0.01)。Apo與IDPN均可使大鼠紋狀體DAT表達量明顯增高(Apo誘導模型組：p0.01；IDPN誘導模型組：p0.01)。給予藥物治療后,統(tǒng)計結果顯示,天麻素可顯著降低Apo誘導模型組紋狀體DAT表達量,同時顯著升高IDPN誘導模型組紋狀體DAT的蛋白表達。與天麻素對DAT表達量的雙向調(diào)節(jié)作用不同,Hal對于Apo以及IDPN誘導產(chǎn)生的異常升高和降低的紋狀體DAT蛋白表達量,均未表現(xiàn)出明顯的干預調(diào)節(jié)作用。結論1.天麻素具有與Hal相似的抑制TS模型大鼠刻板運動的作用。2.天麻素對TS模型大鼠紋狀體細胞外液DA濃度具有雙向良性調(diào)節(jié)作用。3.天麻素對TS模型大鼠紋狀體細胞外液DA濃度的雙向良性調(diào)節(jié)作用的實現(xiàn)可能與其對DAT蛋白表達量的雙向調(diào)節(jié)作用有關。目的探討寧動顆粒(Ningdong Granule, NDG)對Tourette綜合征(TS)模型大鼠紋狀體多巴胺(DA)濃度雙向調(diào)節(jié)作用,以進一步明確寧動顆粒治療Tourette綜合征的藥理作用機制。方法70只雄性Wistar大鼠隨機分為3組,分別進行腹腔注射：空白對照組(10只)：腹腔注射生理鹽水5 ml/kg/d；Apo誘導模型組(30只)：腹腔注射阿樸嗎啡(Apo)2mg/kg/d; IDPN誘導模型組(30只)：腹腔注射亞氨基二丙腈(IDPN) 150mg/kg/d。每日上午9：00予以干預,連續(xù)注射7天。Apo造模繼續(xù),將Apo誘導模型組進一步劃分3組,進行藥物干預：Apo模型組(10只)：生理鹽水10ml/kg/d灌胃；Apo+ NDG組(10只)：寧動顆粒370 mg/kg/d灌胃；Apo+Hal組(10只)：氟哌啶醇(Hal) 1.0mg/kg/d灌胃。IDPN誘導模型組進一步劃分3組,進行藥物干預：IDPN模型組(10只)：生理鹽水10ml/kg/d灌胃；IDPN+ NDG組(10只)：寧動顆粒370mg/kg/d灌胃；IDPN+Hal組(10只)：氟哌啶醇1.0mg/kg/d灌胃�？瞻讓φ战M(10只)予生理鹽水10 ml/kg/d灌胃。每日上午9：00Apo造模干預(共持續(xù)3周),下午2：00進行藥物灌胃治療,灌胃治療共持續(xù)8周。造模干預開始后,每隔7天對大鼠的刻板行為進行一次行為學評價。藥物干預結束后,處死各組大鼠,取出紋狀體,分別用高效液相色譜法(HPLC)測量大鼠紋狀體多巴胺濃度,蛋白質免疫印跡(Western-blot)測定大鼠紋狀體多巴胺D2受體蛋白表達。結果1.大鼠刻板運動的行為學評價重復測量性方差分析顯示,Apo及IDPN誘導的TS大鼠均表現(xiàn)出明顯的組間效應(Apo誘導模型組：F2,27=22.73,p0.01；IDPN誘導模型組：F2,27=42.25,p0.01)。造模干預后,與空白對照組對比,Apo和IDPN均可誘導大鼠產(chǎn)生明顯的刻板行為(Apo誘導模型組：p0.01；IDPN誘導模型組：p0.01)。分別給予干預治療后,與Apo模型組及IDPN模型組對比,統(tǒng)計結果顯示,寧動顆粒和Hal均可明顯減輕兩種造模藥誘發(fā)的刻板運動(Apo+ NDG組vs Apo+ saline組,p0.01,IDPN+ NDG組vs IDPN+ saline組,pP0.01；Apo+ Hal組vs Apo +saline組,p0.01,IDPN+ Hal組vs IDPN+ saline組,p0.01)。2.寧動顆粒對大鼠紋狀體DA濃度的影響方差分析顯示,Apo誘導模型組與IDPN誘導模型組均有明顯的組間效應(Apo誘導模型組：F3,36=30.79,p0.01；IDPN誘導模型組：F3,36.16.07,p0.01)。統(tǒng)計結果表明,Apo與IDPN對TS大鼠紋狀體DA濃度的作用截然相反：Apo可明顯升高大鼠紋狀體的DA濃度；而IDPN則使紋狀體DA濃度明顯降低。分別給予治療干預后,結果表明,寧動顆�？娠@著降低Apo誘導升高的紋狀體的DA濃度,同時顯著升高IDPN誘導降低的紋狀體DA濃度。一言概之,無論對異常升高或降低的DA濃度,寧動顆粒均具有對其進行調(diào)節(jié),使之恢復正常的作用。與寧動顆粒對DA濃度的良性調(diào)節(jié)作用不同,Hal對于Apo以及IDPN誘導產(chǎn)生的異常的紋狀體DA,均未表現(xiàn)出明顯的干預調(diào)節(jié)作用。3.寧動顆粒對大鼠紋狀體DRD2表達的影響方差分析顯示,Apo誘導模型組與IDPN誘導模型組均有明顯的組間效應(Apo誘導模型組：F3,36.24.69,p0.01；IDPN誘導模型組：F3,36.29.73,p0.01)。統(tǒng)計結果表明,Apo與IDPN均可使TS模型大鼠紋狀體DRD2表達明顯升高(Apo誘導模型組：p0.01；IDPN誘導模型組：p0.01)。分別給予干預治療后,與Apo模型組及IDPN模型組對比,統(tǒng)計結果顯示,寧動顆粒和Hal均可降低兩種造模藥誘發(fā)產(chǎn)生的紋狀體DRD2表達增高(Apo+ NDG組vsApo+ saline組,p0.01,IDPN+ NDG組vs IDPN+ saline組,p0.01；Apo+Hal組vs Apo+ saline組(?)p0.01；IDPN+ Hal組vs IDPN+ saline組,p0.01)。結論1.寧動顆粒具有與Hal相似的、抑制TS模型大鼠刻板運動的作用。2.寧動顆粒對TS模型大鼠紋狀體DA具有雙向良性調(diào)節(jié)作用。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

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9 記者 白毅 通訊員 孫國根;[N];中國醫(yī)藥報;2014年

10 記者 孫國根;[N];健康報;2014年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊靜;消癌解毒方干預W256移植瘤大鼠生存及血、尿代謝的研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2015年

2 韓梅;大鼠前扣帶皮層SIP30參與痛厭惡情緒反應的細胞分子機制[D];復旦大學;2011年

3 李麗紅;卵巢雌激素剝奪對成年大鼠傷害性反應的影響及其機制探討[D];復旦大學;2011年

4 李志遠;瑞舒伐他汀對急性心肌梗死大鼠左心房交感神經(jīng)重構的影響[D];山東大學;2015年

5 張文強;IL-13對大鼠佐劑性關節(jié)炎的作用及相關機制研究[D];山東大學;2015年

6 宋勇峰;促甲狀腺激素調(diào)節(jié)肝臟膽固醇轉化的機制研究[D];山東大學;2015年

7 沈夏鋒;早期運動訓練對大鼠重度顱腦外傷后腦功能的作用及其機制研究[D];復旦大學;2013年

8 韓海峰;十二指腸空腸旁路術對T2DM大鼠肝臟脂肪沉積的影響和機制研究[D];山東大學;2015年

9 黃新忠;Sirt1對5/6腎切除大鼠的保護作用及相關機制探討[D];復旦大學;2012年

10 李倩;NALP1炎癥小體在大鼠神經(jīng)痛及痛情緒中的作用及電針緩解痛情緒作用觀察[D];復旦大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李變芳;鈣對鉛致大鼠腦組織損傷的營養(yǎng)干預機制研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學;2015年

2 孟靜;鈣對染鉛大鼠骨骼損傷干預機制的研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學;2015年

3 鄭東;姜黃素對糖尿病大鼠海馬神經(jīng)元的作用研究[D];湖北科技學院;2015年

4 張敏麗;山楂葉總黃酮對大鼠糖尿病心肌病的保護作用及機制研究[D];湖北科技學院;2015年

5 董婷;甘草甜素對大鼠HAART藥物心肌損傷的保護效應與機制[D];福建醫(yī)科大學;2015年

6 張迪;不同途徑移植人臍帶間充質干細胞治療糖尿病大鼠的實驗研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2013年

7 劉波;靶向超聲造影對GK大鼠腎臟血流灌注的實驗研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2013年

8 王璐;α7nACh受體在孕期煙熏抑制新生大鼠RRDA中的作用[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2014年

9 文實;基于核磁共振的SD大鼠誘導的胰腺癌及上皮內(nèi)瘤變組織水溶性萃取物代謝組學研究[D];福建醫(yī)科大學;2015年

10 袁鑫;二甲雙胍對鏈脲佐菌素所致大鼠認知功能障礙的作用研究[D];湖北科技學院;2015年

  本文關鍵詞：天麻素與寧動顆粒對Tourette綜合征大鼠紋狀體多巴胺雙向調(diào)節(jié)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：191952