本文關(guān)鍵詞：光熱型超聲造影劑的制備及其用于腫瘤診療的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《昆明醫(yī)科大學(xué)》 2015年

乳腺癌回流淋巴結(jié)靶向微泡的制備研究

楊陽(yáng)  

【摘要】：目的：①優(yōu)化制備抗體高粘附率淋巴管靶向脂質(zhì)微泡,即載VEGFR-3抗體和Podoplanin抗體的靶向微泡并做相關(guān)理化性質(zhì)評(píng)價(jià)。②在體外試驗(yàn)中觀察其尋靶效果。③探討體外試驗(yàn)中,推動(dòng)超聲造影劑位移的有效超聲輻射力參數(shù)。方法：①利用生物素-親和素橋接法制備載VEGFR-3抗體和Podoplanin抗體的靶向脂質(zhì)微泡,優(yōu)化制備工藝、改進(jìn)制作流程、調(diào)整脂質(zhì)、生物素及親和素配比,利用免疫熒光進(jìn)行相關(guān)評(píng)價(jià)②采用分組對(duì)照試驗(yàn),以直接、間接法觀察尋靶效果,直接法：普通微泡與靶向微泡分別加入到淋巴管細(xì)胞培養(yǎng)皿中,孵育10min,洗滌3遍,將兩組置于顯微鏡下進(jìn)行觀察,使用圖像分析軟件IPP進(jìn)行離線分析及采用SPSS軟件包對(duì)與細(xì)胞結(jié)合的微泡數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；間接法：利用微泡和細(xì)胞重量的差異,采用分組孵育、離心法直觀觀察靶向結(jié)合效果③分別在流體靜止及模擬淋巴液流動(dòng)條件下,以及管腔處于深部時(shí),尋找推動(dòng)微泡位移到對(duì)側(cè)管壁的最佳輻射力參數(shù),利用高速攝像機(jī)評(píng)價(jià)其對(duì)微泡的推移效果。結(jié)果：①成功制備了高粘附率靶向微泡：平均粒徑為0.99μm,流式細(xì)胞儀證實(shí)平均抗體結(jié)合率達(dá)81.3%②圖像軟件IPP離線分析顯示靶向組微泡與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合數(shù)量明顯優(yōu)于普通組；高倍顯微鏡下(×100倍)靶向組平均每個(gè)視野有(151±20)個(gè)靶向微泡粘附,普通組平均每個(gè)視野有(12±4)個(gè)普通微泡粘附(t=19.19,P0.01,結(jié)果有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)；與普通微泡相比,靶向微泡與細(xì)胞大量結(jié)合,且在400g離心力下仍能保持牢固的鏈接③靜止條件下,峰值負(fù)壓530kPa,占空比0.031,脈沖重復(fù)頻率0.97kHz,聲強(qiáng)0.29w/cm2,機(jī)械指數(shù)0.35,恰好能使微泡貼于對(duì)側(cè)管壁；以淋巴液流速流動(dòng)時(shí),有1/2左右的微泡從管腔中央流走,而沒(méi)貼于管壁,若加大輻照參數(shù),雖貼壁微泡增多,但75%被高聲壓擊破；輻射力先作用于淺部管腔,淺部管腔中的微泡被完全阻斷或分離開(kāi)后深部管腔內(nèi)微泡才能受到聲輻射力作用。結(jié)論：①在生物素-親和素橋接法的基礎(chǔ)上,對(duì)靶向微泡的制備工藝、流程、試劑配比等方面進(jìn)行相關(guān)優(yōu)化,成功制備了粒徑小而均一的VEGFR-3抗體及Podoplanin抗體高粘附率淋巴管靶向微泡,并在體外尋靶試驗(yàn)中得到驗(yàn)證；②此抗體高粘附率靶向造影劑的成功制備及較好的體外尋靶效果,為在體腫瘤新生淋巴管靶向顯影提供了重要實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),有望使造影劑大量聚集、長(zhǎng)時(shí)間停留在腫瘤新生淋巴管靶區(qū),增強(qiáng)對(duì)比顯像效果,相比快速消退的非靶區(qū)更容易被識(shí)別。也就是說(shuō),這種抗體高粘附率靶向微泡有望作為一種特異性識(shí)別淋巴系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞的分子探針,在超聲追蹤下,準(zhǔn)確顯示腫瘤新生淋巴管,并對(duì)腫瘤良惡性質(zhì)做出快速鑒別；③輻射力可推移管腔中的微泡更多的貼壁,但在不同流動(dòng)狀態(tài)下及位置條件下所需輻射力參數(shù)和效果不同。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R445.1;R737.9
【目錄】：

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