發(fā)布時間：2025-06-19 00:13

　　 目的:了解貴州關(guān)嶺余甘子內(nèi)生真菌的多樣性,探究余甘子果汁抗氧化及抑菌功能的相關(guān)性。方法:取貴州省關(guān)嶺縣10月份野生健康成熟新鮮的余甘子果實,采用研磨法獲得余甘子果汁;采用組織分離法對果實進(jìn)行內(nèi)生真菌分離,按照菌絲尖端切割法接種至馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基純化3次并保存;取本校真菌室提供的標(biāo)準(zhǔn)菌株,采用Ezup柱式真菌基因組DNA抽提試劑盒提取分離獲得的真菌菌株DNA、并通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增其內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）基因序列后測序,采用分子系統(tǒng)學(xué)方法對分離獲得的真菌菌株進(jìn)行鑒定、歸類及多樣性評估,采用鄰接法（N-J）基于ITS序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹;搖床培養(yǎng)提取內(nèi)生菌發(fā)酵液,采用紙片擴(kuò)散法對發(fā)酵液和余甘子果汁進(jìn)行抑菌活性測試,并繪制維生素C（Vc）標(biāo)準(zhǔn)曲線測定菌株的總抗氧化能力。結(jié)果:余甘子果實中分離出內(nèi)生真菌43株,其中青霉屬19株、橫梗霉屬9株、間座殼屬11株、葉點霉屬1株、葡萄座腔菌屬3株,青霉屬為優(yōu)勢屬,其中Penicillium chrysogenum分離出15株,數(shù)量最多,為優(yōu)勢菌種;ITS序列比對結(jié)果顯示,分離株43株、標(biāo)準(zhǔn)株5株,構(gòu)建N-J系統(tǒng)發(fā)育樹;43株內(nèi)...

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【部分圖文】：

圖1 43株余甘子內(nèi)生真菌菌屬的構(gòu)成

健康成熟新鮮余甘子果實中分離出內(nèi)生真菌43株，其中青霉屬(PenicilliumLink)19株、橫梗霉屬(LichtheimiaVuill.)9株、間座殼屬(DiaportheNitschke)11株、葉點霉屬(PhyllostictaPers.)1株、葡萄座腔菌屬(N....

圖2 43株余甘子內(nèi)生真菌菌種的構(gòu)成

圖143株余甘子內(nèi)生真菌菌屬的構(gòu)成2.2分離菌株系統(tǒng)發(fā)育分析

圖3 43株菌株基于ITS序列的構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹

對分離出的內(nèi)生真菌基于ITS序列進(jìn)行比對，每個菌屬選擇1個標(biāo)準(zhǔn)菌株，共有分離株43株，標(biāo)準(zhǔn)株5株，構(gòu)建N-J系統(tǒng)發(fā)育樹。見圖3。2.3抑菌活性測試

圖4 Vc標(biāo)準(zhǔn)曲線

由實驗的標(biāo)準(zhǔn)品對照得出，Vc標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y^=0.8095x-0.0828,R2=0.9937(圖4);經(jīng)樣品測試，43株菌的發(fā)酵液總抗氧化能力明顯高于空白培養(yǎng)基，相對于Vc的抗氧化能力范圍介于104.76～156.64mg/L，其中YGZ02菌株能力最低，YGZ....

本文編號：4050554