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Wnt3a基因?qū)δ氀獊碓碈D34~+造血干/祖細(xì)胞體外擴(kuò)增及定向分化作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-09 15:07
  Wnt家族蛋白及其受體、調(diào)節(jié)蛋白等共同組成了復(fù)雜的信號通路,在動(dòng)物的發(fā)育與干細(xì)胞命運(yùn)的調(diào)控方面都起著重要的作用。Wnt信號通路不僅直接促進(jìn)造血干細(xì)胞的自我更新,而且還通過影響造血干細(xì)胞微環(huán)境而間接地影響造血干細(xì)胞的功能。Wnt家族成員之一Wnt3a在造血干/祖細(xì)胞自我更新的過程中發(fā)揮著重要的作用。鑒于此我們通過構(gòu)建攜帶Wnt3a基因的腺病毒感染原代小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,建立轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層細(xì)胞。通過與臍血CD34+造血干/祖細(xì)胞的共培養(yǎng)研究轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層細(xì)胞擴(kuò)增CD34+造血干/祖細(xì)胞的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與普通滋養(yǎng)層加細(xì)胞因子組相比,轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層加細(xì)胞因子組培養(yǎng)的CD34+造血干/祖細(xì)胞集落形成能力(CFC)是其1.55±0.06倍;混合集落形成能力是其1.95±0.26倍;高增殖潛能集落形成能力(HPP-CFC)是其1.45±0.40倍;LTC-IC活性是其3.83±0.86倍。結(jié)果表明Wnt3a轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層細(xì)胞通過分泌Wnt3a蛋白,實(shí)現(xiàn)其體外擴(kuò)增造血干/祖細(xì)胞的作用。 我們在轉(zhuǎn)Wnt3a滋養(yǎng)層細(xì)胞成功培養(yǎng)擴(kuò)增CD34... 

【文章來源】:中國人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:100 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
縮略語表
前言
主要儀器
主要試劑
第一部分 轉(zhuǎn) Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)層的建立與檢測
    第一節(jié) Wnt3a基因的克隆
        材料與方法
        實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第二節(jié) pAd-Wnt3a重組腺病毒質(zhì)粒的構(gòu)建
        材料與方法
        實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第三節(jié) 轉(zhuǎn)Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)層的建立
        材料與方法
        實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
+造血干/祖細(xì)胞擴(kuò)增作用">第二部分 轉(zhuǎn)Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)層對 CD34+造血干/祖細(xì)胞擴(kuò)增作用
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
+造血干/祖細(xì)胞的紅系分化潛能的影響">第三部分 轉(zhuǎn)Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)層對擴(kuò)增后 CD34+造血干/祖細(xì)胞的紅系分化潛能的影響
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
+造血干/祖細(xì)胞紅系分化潛能機(jī)制的初步探討">第四部分 Wnt3a影響 CD34+造血干/祖細(xì)胞紅系分化潛能機(jī)制的初步探討
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
總結(jié)
致謝
博士期間已完成或發(fā)表的論著
附錄 博士期間發(fā)表的部分論著


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Wnt3a轉(zhuǎn)基因基質(zhì)細(xì)胞的建立及其對臍血CD34+造血干/祖細(xì)胞擴(kuò)增作用的研究[J]. 師偉,韓姝,李艷華,謝小燕,施雙雙,陳琳,白慈賢,閆舫,南雪,王韞芳,裴雪濤.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2005(09)
[2]骨髓來源基質(zhì)細(xì)胞促進(jìn)造血重建的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 施小鳳,傅晉翔,朱孝中.  中國血液流變學(xué)雜志. 2004(01)



本文編號:2907057

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