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甾體衍生物02F04通過(guò)非核受體上調(diào)PAM212細(xì)胞胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-11 18:17
  目的:探索02F04誘導(dǎo)TSLP表達(dá)是否通過(guò)核受體介導(dǎo)。方法:一系列濃度的6種核受體,包括視黃酸受體(RAR)、維甲酸X受體(RXR)、過(guò)氧化物酶體增生物激活受體(PPAR)、維生素D受體(VDR)、糖皮質(zhì)激素受體(GR)和肝X受體(LXR)的激動(dòng)劑和抑制劑,單用或者與10μmol/L 02F04聯(lián)合刺激PAM212細(xì)胞24 h后,ELISA法測(cè)定培養(yǎng)上清中TSLP的蛋白水平,MTT法檢測(cè)PAM212細(xì)胞的存活率。10μmol/L 02F04刺激PAM212細(xì)胞4、8、12或24 h,實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)測(cè)定細(xì)胞中相應(yīng)核受體靶向基因的表達(dá)。結(jié)果:VDR激動(dòng)劑不能增加PAM212細(xì)胞中TSLP的表達(dá)。02F04不能誘導(dǎo)RAR、RXR和PPAR靶向基因的表達(dá),且RARα、PPARγ和PPARδ的激動(dòng)劑及抑制劑單用或與02F04合用后均不影響TSLP的產(chǎn)生; RARγ、RXR和GR激動(dòng)劑可抑制細(xì)胞基本水平及02F04誘導(dǎo)水平的TSLP產(chǎn)生,而抑制劑未呈現(xiàn)出相反的結(jié)果。02F04可激活LXR并增加靶向基因ABCA1的表達(dá),但LXR激動(dòng)劑不能誘導(dǎo)TSLP產(chǎn)生,LXR抑制劑也不能抑制02F04誘... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2019年11期 第1289-1294頁(yè) 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【部分圖文】:

甾體衍生物02F04通過(guò)非核受體上調(diào)PAM212細(xì)胞胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素的研究


F04和22(R)-羥基膽固醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1Chemicalstructuresof02F04and22(R)-hydroxy-

細(xì)胞,激動(dòng)劑,刺激濃度,核受體


時(shí),TSLP的蛋白水平如圖2A所示。02F04能顯著刺激PAM212細(xì)胞中TSLP表達(dá)的上調(diào),且在0.3~30μmol/L范圍內(nèi),隨著02F04刺激濃度的增加,PAM212細(xì)胞中TSLP的產(chǎn)生增多。然而,當(dāng)02F04的濃度為30μmol/L時(shí),細(xì)胞存活率急劇降低至55.8%。因此,后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇02F04的濃度為10μmol/L進(jìn)行進(jìn)一步考察。圖2B表明隨著02F04刺激時(shí)間的延長(zhǎng),PAM212細(xì)胞的TSLP基因表達(dá)量也在不斷增加,24h與對(duì)照組比已有顯著性差異(P<0.001),48h表達(dá)進(jìn)一步增加。2.2PAM212細(xì)胞中TSLP的表達(dá)與VDR無(wú)關(guān)VDR激動(dòng)劑MC903在0.3~10μmol/L范圍內(nèi)刺激圖202F04對(duì)PAM212細(xì)胞TSLP表達(dá)的影響Fig.2Effectof02F04onTSLPexpressioninPAM212cellsNote:*.P<0.05,**.P<0.01,***.P<0.001vsthecorrespondingcontrol;A.■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability;B.Valuesinthecontrolgroupwithtreatmentfor8hweresetto1.0.圖3VDR激動(dòng)劑不能誘導(dǎo)PAM212細(xì)胞中TSLP的表達(dá)Fig.3TSLPexpressioninPAM212cellswasnotinducedbyagonistofVDRNote:■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability.翁琰等甾體衍生物02F04通過(guò)非核受體上調(diào)PAM212細(xì)胞胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素的研究第11期·1921·

激動(dòng)劑,核受體,甾體,細(xì)胞


mol/L進(jìn)行進(jìn)一步考察。圖2B表明隨著02F04刺激時(shí)間的延長(zhǎng),PAM212細(xì)胞的TSLP基因表達(dá)量也在不斷增加,24h與對(duì)照組比已有顯著性差異(P<0.001),48h表達(dá)進(jìn)一步增加。2.2PAM212細(xì)胞中TSLP的表達(dá)與VDR無(wú)關(guān)VDR激動(dòng)劑MC903在0.3~10μmol/L范圍內(nèi)刺激圖202F04對(duì)PAM212細(xì)胞TSLP表達(dá)的影響Fig.2Effectof02F04onTSLPexpressioninPAM212cellsNote:*.P<0.05,**.P<0.01,***.P<0.001vsthecorrespondingcontrol;A.■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability;B.Valuesinthecontrolgroupwithtreatmentfor8hweresetto1.0.圖3VDR激動(dòng)劑不能誘導(dǎo)PAM212細(xì)胞中TSLP的表達(dá)Fig.3TSLPexpressioninPAM212cellswasnotinducedbyagonistofVDRNote:■.TSLPproduction;-◇-.Cellviability.翁琰等甾體衍生物02F04通過(guò)非核受體上調(diào)PAM212細(xì)胞胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素的研究第11期·1921·

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TSLP促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞向哮喘小鼠氣道募集[J]. 孟平,陳壯桂,張?zhí)焱?李洪濤,鄒小玲,楊海玲.  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2016(06)



本文編號(hào):2911004

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