a国产,中文字幕久久波多野结衣AV,欧美粗大猛烈老熟妇,女人av天堂

當(dāng)前位置:主頁 > 醫(yī)學(xué)論文 > 病理論文 >

FAH基因敲除克隆小型豬的制備及繁育

發(fā)布時間:2020-12-18 22:40
  目的供體的短缺是器官移植所面臨的主要問題,制備人源化器官是解決此問題的有效途徑之一。缺乏延胡索酸乙酰乙酸水解酶(fumarylacetoacetate hydrolase, FAH)會引起遺傳性酪氨酸血癥Ⅰ型(hereditary tyrosinemia typeⅠ, HTⅠ),致使患者肝細(xì)胞凋亡,呈現(xiàn)出肝損傷。對豬(Sus scrofa)進(jìn)行基因編輯,建立FAH基因敲除巴馬小型豬,結(jié)合人干細(xì)胞將有利于人源化干細(xì)胞肝的制備。本研究在α-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因(α-1, 3-galactosyltransferase,GGTA1)敲除巴馬小型豬的基礎(chǔ)上,通過CRISPR/Cas9技術(shù)制備FAH基因敲除(FAH+/-、FAH-/-)小型豬,并分析其健康與繁育狀況。方法針對豬FAH基因設(shè)計單鏈導(dǎo)向RNA (single guide RNA, sgRNA)構(gòu)建pX330表達(dá)載體轉(zhuǎn)染巴馬小型豬耳成纖維細(xì)胞(ear fibroblasts of Bama minipigs, BMEF)并進(jìn)行敲除效率驗證,鑒定后選擇陽性細(xì)胞作為核供體,通過體細(xì)胞核移植... 

【文章來源】:中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2019年05期 北大核心

【文章頁數(shù)】:9 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 細(xì)胞系
        1.1.3 質(zhì)粒
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 實驗方法
        1.3.1 打靶載體構(gòu)建
        1.3.2 轉(zhuǎn)染
        1.3.3 sgRNA敲除效率檢測
        1.3.4 單細(xì)胞克隆的獲得及鑒定
        1.3.5 FAH基因敲除克隆豬的制備及鑒定
        1.3.6 仔豬血常規(guī)及血生化檢測
        1.3.7 組織學(xué)切片觀察
        1.3.8 Western blot檢測
        1.3.9 FAH+/-豬繁育能力及統(tǒng)計學(xué)分析
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 打靶載體構(gòu)建及效率檢測
    2.2 單細(xì)胞克隆突變類型的鑒定
    2.3 FAH基因敲除豬的制備與鑒定
    2.4 仔豬血液檢測
    2.5 組織學(xué)切片觀察
    2.6 Western blot檢測
    2.7 FAH+/-豬繁育能力分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]CRISPR/Cas9介導(dǎo)CMAH基因敲除豬創(chuàng)制及繁育分析[J]. 黃林華,李西睿,龍川,石寧寧,馮沖,杜敏杰,朱輝斌,潘登科,孫秀柱.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2018(06)
[2]CRISPR/Cas9介導(dǎo)的β4GalNT2基因敲除豬制備[J]. 唐雨婷,高景波,龍川,杜敏杰,黃林華,潘登科,杜曉華.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2017(10)
[3]Highly efficient generation of GGTA1 knockout pigs using a combination of TALEN m RNA and magnetic beads with somatic cell nuclear transfer[J]. FENG Chong,LI Xi-rui,CUI Hui-ting,LONG Chuan,LIU Xia,TIAN Xing-hua,PAN Deng-ke,LUO Yu-zhu.  Journal of Integrative Agriculture. 2016(07)
[4]干細(xì)胞移植治療肝功能衰竭的研究進(jìn)展及應(yīng)用前景[J]. 吳貽琛,萬志紅,辛紹杰.  肝臟. 2015(03)
[5]檸檬百里香葉揮發(fā)油成分分析及對肝癌細(xì)胞毒性作用[J]. 吳爽,魏鳳香,李紅枝,劉小廣,張建華,劉君星.  中藥材. 2013(05)
[6]利用啟動子缺陷型打靶載體敲除五指山小型豬GGTA1基因[J]. 鄭道山,馮沖,朱彥賓,龍川,馮書堂,潘登科,馬文麗.  生物技術(shù)通訊. 2011(04)
[7]新型生物人工肝系統(tǒng)治療急性肝衰竭犬后豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒傳播的實驗研究[J]. 陳鐘,陳瑞新,丁義濤,田鵬鵬,周卉.  南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2007(03)

碩士論文
[1]人肝源性干細(xì)胞在Fah-/-Rag2-/-小鼠中生物學(xué)行為的研究[D]. 劉芳遐.第二軍醫(yī)大學(xué) 2010



本文編號:2924726

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://www.wukwdryxk.cn/yixuelunwen/binglixuelunwen/2924726.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶de1eb***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
乱片福利导航| 小蜜桃1| 亚洲色欲色欲www在线丝| 亚洲av永久无码精品网址| 鲁死你资源站亚洲av一级aⅴ| 伊人色网| 麻豆成人91精品二区三区| 2021年国产中文字无码专区| 日韩成人极品在线内射3p蜜臀 | 伊人久久大香线蕉AV一区二区| 日韩精品无码人成视频| 国产成人精品高清在线观看93| 久久久亚洲欧洲日产国码二区| 久久精品国产精品亚洲色婷婷 | 欧美人与禽猛交狂配| 91色视频| 亚洲在线av| 亚洲一级a| 久久综合爱| 国产一区二区三区四区五区美女| 狠狠狠色丁香综合婷婷久久 | 免费a级毛片无码免费视频120软件| 亚洲熟妇AV日韩熟妇在线| 亚洲另类无码专区丝袜| 成人无码区免费a∨| 亚洲无码在线精品视频| 岛国精品一区免费视频在线观看| 亚洲欧洲AV无码专区| 牛牛国产亚洲精品无码专区高清| 国产精品一区二区三乱码| 怡红院成永久免费人视频无毒| 国产乱人激情h在线观看| 星辰视频在线观看电影| 金九月饼价格表| 在线亚洲一区| 日韩人妻中文字幕| 午夜视| 久久久久久久精品国产怎么下| 想要爱爱| 久久久久97| 九色少妇丨porny丨自拍|