發(fā)布時間：2020-12-22 10:06

　　目的： 20世紀(jì)90年代以來，多種人類腫瘤抗原基因克隆的成功，大大推動了腫瘤免疫學(xué)理論的發(fā)展，也促進(jìn)了腫瘤免疫診斷和免疫治療的應(yīng)用。由于腫瘤抗原在腫瘤診斷與治療中具有重要的靶向作用，以及在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展的基礎(chǔ)研究中的重要作用，因此尋找特異性強(qiáng)、基因功能和生化機(jī)理明確的靶分子成為腫瘤學(xué)、生物學(xué)的研究熱點。近年來，乳腺癌的發(fā)病率日趨增高，在乳腺癌特異抗原標(biāo)志的眾多研究中，除c-erbB-2的特異性較高外，一直未有新的特異性和靈敏度較高的乳腺癌抗原的報道。本研究針對我院前期制備的一株乳腺癌單克隆抗體（M4G3），利用cDNA文庫的構(gòu)建和篩選技術(shù)，完成了此乳腺癌特異抗原基因的克隆與表達(dá)，為此抗體的臨床應(yīng)用及進(jìn)一步闡明乳腺癌發(fā)生、發(fā)展機(jī)制提供了可靠的依據(jù)。 方法： 第一部分：復(fù)蘇M4G3雜交瘤細(xì)胞，體外培養(yǎng)，小鼠腹腔注射，進(jìn)行單克隆抗體的大量制備；復(fù)蘇T47D等四種乳腺癌細(xì)胞，體外培養(yǎng)，爬片，應(yīng)用M4G3進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)實驗；四種細(xì)胞收集，應(yīng)用M4G3進(jìn)行Western-blot染色。 第二部分：以λgt11為載體構(gòu)建乳腺癌細(xì)胞T47D的cDNA表達(dá)文庫；對構(gòu)建的文庫進(jìn)... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

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從右圖可見電泳顯示285、185兩條帶清晰、位置正確，RNA完整性好，未降解。(圖2.1)100圖2.1總RNA電泳二、mRNA的提取(見圖2.2)將上述高質(zhì)量RNA樣本合并后，采用磁珠法提取mRNA，瓊脂糖凝膠電泳34

cDNA電泳(圖2.4)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乳腺癌單鏈抗體制備及其在荷人乳腺癌裸鼠中的放免顯像[J]. 牛瑞芳,常克力,朱殿清,龐雁.  中國腫瘤臨床. 2001(10)
[2]隱性乳腺癌的全乳腺次連續(xù)大切片檢查[J]. 牛昀,范宇,傅西林.  中華腫瘤雜志. 1995(04)



本文編號：2931576