發(fā)布時(shí)間：2024-03-28 04:12

　　目的以含大鼠Ⅳ型膠原α3鏈的非膠原區(qū)[α3(Ⅳ)NC1]的多肽pCol(24-38)作為抗原建立抗腎小球基底膜(GBM)病大鼠模型,研究抗GBM病的發(fā)病機(jī)制。方法選擇雄性WKY大鼠20只(8～10周齡),體重120～150g,隨機(jī)分為對(duì)照組和抗GBM病模型組,每組10只。抗GBM病模型組使用多肽pCol(24-38)作為抗原,對(duì)照組使用多肽pCol(38-52)作為抗原,兩組均用完全弗氏佐劑乳化后,于大鼠背部皮下三點(diǎn)注射免疫。免疫后每周定時(shí)收集24h尿,測(cè)尿蛋白含量,所有動(dòng)物在免疫后49d處死,取血清,采用肌氨酸氧化酶法檢測(cè)血清肌酐,脲酶法檢測(cè)尿素氮濃度,并用間接ELISA法檢測(cè)血清抗pCol(24-38)抗體相對(duì)滴度。取腎臟組織,一部分石蠟切片后行PAS染色及免疫組化染色,另一部分經(jīng)OCT包埋冷凍切片后用直接免疫熒光法檢測(cè)IgG在腎小球的沉積情況。結(jié)果與對(duì)照組比較,抗GBM病模型組的24h尿蛋白含量自第4周開始明顯升高[(52.27±10.50)mg/24h vs.(4.87±0.64)mg/24h,P<0.001],之后逐漸上升,至第7周,抗GBM病模型組的24h尿蛋白含量仍...

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 多肽合成及免疫
    1.3 生化指標(biāo)檢測(cè)及腎臟病理檢測(cè)
        1.3.1 尿蛋白、血清肌酐及尿素氮檢測(cè)
        1.3.2 腎小球異常評(píng)定
        1.3.3 巨噬細(xì)胞浸潤情況檢測(cè)
        1.3.4 間接ELISA法檢測(cè)血清中抗GBM抗體的水平
        1.3.5評(píng)估Ig G在GBM上的沉積情況
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 兩組2 4 h尿蛋白定量比較
    2.2 兩組血清肌酐及尿素氮水平比較
    2.3 病理學(xué)觀察
        2.3.1 腎臟與腎小球異常
        2.3.2 腎小球巨噬細(xì)胞浸潤情況
    2.4 抗體應(yīng)答的評(píng)估
    2.5 IgG在GBM上的沉積情況
3 討論



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