河北部分區(qū)域奶牛乳房炎主要致病菌鑒定及多重PCR檢測方法的建立
發(fā)布時間：2020-12-12 08:55
奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖過程中的常見疾病之一,并且在有奶牛飼養(yǎng)的地區(qū)均有此病的發(fā)生。該病的發(fā)生與飼養(yǎng)管理和環(huán)境因素密切相關(guān),一旦發(fā)病,難以控制其傳播或從根本上消除。本研究根據(jù)河北DHI數(shù)據(jù)監(jiān)測奶牛體細(xì)胞水平,對邯鄲、衡水、石家莊、滄州、保定、廊坊、張家口等七個地區(qū)規(guī)�；膛ｐB(yǎng)殖場采集的175份奶樣進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)、形態(tài)觀察、生化試驗等,從而對所分離的細(xì)菌進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示,從175份奶樣中分離出了4種主要致病菌。其中,金黃色葡萄球菌有93株,占53.1%;無乳鏈球菌有85株,占48.6%;大腸桿菌共112株,占64%;綠膿桿菌共28株,占16%。在檢出的奶樣中大部分表現(xiàn)為金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌和大腸桿菌的混合感染,并且檢出的28株綠膿桿菌均是由張家口地區(qū)和石家莊地區(qū)的奶樣中分離得到,且其中的12株為單獨感染。本試驗根據(jù)引起奶牛乳房炎主要致病菌金黃色葡萄球菌的nuc基因、無乳鏈球菌的ef-tu基因、大腸桿菌的phoA基因和綠膿桿菌的eta基因保守序列設(shè)計并合成4對特異性引物,所擴(kuò)增目的片段的大小分別為920bp、515bp、268bp和126bp。通過對四種細(xì)菌的單一PCR檢測法進(jìn)行退火...
【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省
【文章頁數(shù)】：57 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基Figure3MacconkeyAgarmedium
3 結(jié)果與分析3.1 病原菌的分離鑒定3.1.1 病原菌分離培養(yǎng)結(jié)果從 175 份奶樣中分離出 4 種主要致病菌。其中金黃色葡萄球菌 93 株，占 53.1%；無乳鏈球菌 85 株，占 48.6%；大腸桿菌 112 株，占 64%；綠膿桿菌 28 株，占 16%。將初步鑒定的疑似金黃色葡萄球菌的菌液接種于甘露醇高鹽瓊脂和 B-P 瓊脂上，在甘露醇高鹽瓊脂上可見金黃色葡萄球菌由于能夠利用甘露醇產(chǎn)酸使酚紅由紅色變?yōu)辄S色；在 B-P 瓊脂培養(yǎng)基上可見有黑色菌落生長且菌落周圍有渾濁帶；將疑似大腸桿菌的菌液接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基可見有粉紅色菌落生長，同時將菌液接種于伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基可見菌落有金屬光澤；將疑似無乳鏈球菌的菌液接種于血瓊脂培養(yǎng)基可見乳白色、圓形的小菌落；而綠膿桿菌在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂培養(yǎng)基上生長良好，形成綠色的菌落。結(jié)果見圖 1、2、3、4、5、6。
3 結(jié)果與分析3.1 病原菌的分離鑒定3.1.1 病原菌分離培養(yǎng)結(jié)果從 175 份奶樣中分離出 4 種主要致病菌。其中金黃色葡萄球菌 93 株，占 53.1%；無乳鏈球菌 85 株，占 48.6%；大腸桿菌 112 株，占 64%；綠膿桿菌 28 株，占 16%。將初步鑒定的疑似金黃色葡萄球菌的菌液接種于甘露醇高鹽瓊脂和 B-P 瓊脂上，在甘露醇高鹽瓊脂上可見金黃色葡萄球菌由于能夠利用甘露醇產(chǎn)酸使酚紅由紅色變?yōu)辄S色；在 B-P 瓊脂培養(yǎng)基上可見有黑色菌落生長且菌落周圍有渾濁帶；將疑似大腸桿菌的菌液接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基可見有粉紅色菌落生長，同時將菌液接種于伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基可見菌落有金屬光澤；將疑似無乳鏈球菌的菌液接種于血瓊脂培養(yǎng)基可見乳白色、圓形的小菌落；而綠膿桿菌在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂培養(yǎng)基上生長良好，形成綠色的菌落。結(jié)果見圖 1、2、3、4、5、6。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乳清急性期蛋白、乳酶作為奶牛隱性乳腺炎診斷指標(biāo)的研究[J]. 薛永康,閆磊,張震,趙玉璽,虎嘯,朱邯豫,王新莊. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2018(08)
[2]奶牛乳房炎的綜合防治技術(shù)[J]. 畢秀軍,王維浩,吳連華. 山東畜牧獸醫(yī). 2018(02)
[3]快速檢測奶牛乳房炎四種病原菌的多重PCR方法的建立及應(yīng)用[J]. 丁天翊,潘陽陽,何翃閎,趙凌,崔燕,余四九. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2018(01)
[4]奶牛隱性乳房炎研究進(jìn)展[J]. 居自遠(yuǎn),徐小洪,黃炳旭,付守鵬,錢晶. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(32)
[5]多重PCR與細(xì)菌培養(yǎng)法檢測牛乳中病原菌的對比研究[J]. 武守艷,董春光,韓文儒,楊麗華,陳劍波,趙瑞生,夏艷婷,韓一超. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(22)
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[7]中國北方奶牛金葡菌乳房炎感染現(xiàn)狀及耐藥性和流行類型研究進(jìn)展[J]. 王曉,俞英. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2015(09)
[8]11種(株)食源性細(xì)菌基因芯片檢測方法的建立[J]. 高興,辛文文,高姍,康琳,王景林. 生物技術(shù)通報. 2013 (12)
[9]中草藥在奶牛乳房炎防治中的應(yīng)用[J]. 梁鳳華. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2013(01)
[10]奶牛乳房炎的研究進(jìn)展[J]. 畢海林,唐達(dá),唐建華. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2012(21)
博士論文
[1]金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶的功能鑒定及表達(dá)調(diào)控[D]. 胡瑜.上海交通大學(xué) 2013
碩士論文
[1]四種豬冠狀病毒多重RT-PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[D]. 楊艷楠.吉林大學(xué) 2018
[2]山東某規(guī)模化奶牛場乳房炎流行病學(xué)調(diào)查[D]. 韓書娟.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]奶山羊乳房炎病原菌分離鑒定及多重PCR檢測方法建立[D]. 謝曉艷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]奶水牛乳房炎致病菌的分離鑒定及多重PCR檢測方法的建立[D]. 馬麟.廣西大學(xué) 2015
[5]河北省不同地區(qū)奶牛乳房炎主要病原菌的分離鑒定和耐藥性研究[D]. 張月.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[6]多重PCR檢測牛肉中沙門氏菌、單增李斯特菌和大腸桿菌O157：H7的研究[D]. 宋東曉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]奶牛鏈球菌性乳房炎可視化LAMP檢測方法的建立及應(yīng)用[D]. 賀婷.廣西大學(xué) 2014
[8]奶牛乳房炎致病菌分離鑒定及快速診斷試劑盒的研發(fā)與應(yīng)用[D]. 陳亞明.廣西大學(xué) 2014
[9]六種牛源致病性細(xì)菌多重PCR檢測方法的建立[D]. 劉曉丹.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[10]奶牛乳房炎病原菌分離鑒定及其多重PCR檢測方法的建立[D]. 聶培.廣西大學(xué) 2013
本文編號：2912235
【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省
【文章頁數(shù)】：57 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基Figure3MacconkeyAgarmedium
3 結(jié)果與分析3.1 病原菌的分離鑒定3.1.1 病原菌分離培養(yǎng)結(jié)果從 175 份奶樣中分離出 4 種主要致病菌。其中金黃色葡萄球菌 93 株，占 53.1%；無乳鏈球菌 85 株，占 48.6%；大腸桿菌 112 株，占 64%；綠膿桿菌 28 株，占 16%。將初步鑒定的疑似金黃色葡萄球菌的菌液接種于甘露醇高鹽瓊脂和 B-P 瓊脂上，在甘露醇高鹽瓊脂上可見金黃色葡萄球菌由于能夠利用甘露醇產(chǎn)酸使酚紅由紅色變?yōu)辄S色；在 B-P 瓊脂培養(yǎng)基上可見有黑色菌落生長且菌落周圍有渾濁帶；將疑似大腸桿菌的菌液接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基可見有粉紅色菌落生長，同時將菌液接種于伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基可見菌落有金屬光澤；將疑似無乳鏈球菌的菌液接種于血瓊脂培養(yǎng)基可見乳白色、圓形的小菌落；而綠膿桿菌在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂培養(yǎng)基上生長良好，形成綠色的菌落。結(jié)果見圖 1、2、3、4、5、6。
3 結(jié)果與分析3.1 病原菌的分離鑒定3.1.1 病原菌分離培養(yǎng)結(jié)果從 175 份奶樣中分離出 4 種主要致病菌。其中金黃色葡萄球菌 93 株，占 53.1%；無乳鏈球菌 85 株，占 48.6%；大腸桿菌 112 株，占 64%；綠膿桿菌 28 株，占 16%。將初步鑒定的疑似金黃色葡萄球菌的菌液接種于甘露醇高鹽瓊脂和 B-P 瓊脂上，在甘露醇高鹽瓊脂上可見金黃色葡萄球菌由于能夠利用甘露醇產(chǎn)酸使酚紅由紅色變?yōu)辄S色；在 B-P 瓊脂培養(yǎng)基上可見有黑色菌落生長且菌落周圍有渾濁帶；將疑似大腸桿菌的菌液接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基可見有粉紅色菌落生長，同時將菌液接種于伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基可見菌落有金屬光澤；將疑似無乳鏈球菌的菌液接種于血瓊脂培養(yǎng)基可見乳白色、圓形的小菌落；而綠膿桿菌在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂培養(yǎng)基上生長良好，形成綠色的菌落。結(jié)果見圖 1、2、3、4、5、6。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乳清急性期蛋白、乳酶作為奶牛隱性乳腺炎診斷指標(biāo)的研究[J]. 薛永康,閆磊,張震,趙玉璽,虎嘯,朱邯豫,王新莊. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2018(08)
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[3]快速檢測奶牛乳房炎四種病原菌的多重PCR方法的建立及應(yīng)用[J]. 丁天翊,潘陽陽,何翃閎,趙凌,崔燕,余四九. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2018(01)
[4]奶牛隱性乳房炎研究進(jìn)展[J]. 居自遠(yuǎn),徐小洪,黃炳旭,付守鵬,錢晶. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(32)
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[6]中草藥防治奶牛乳房炎的研究進(jìn)展[J]. 何斌,陳潔,金爾光,楊文海,況輝,姚艷豐,陳夏冰,邵志勇,周木清,華娟,彭精明. 中國獸藥雜志. 2016(05)
[7]中國北方奶牛金葡菌乳房炎感染現(xiàn)狀及耐藥性和流行類型研究進(jìn)展[J]. 王曉,俞英. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2015(09)
[8]11種(株)食源性細(xì)菌基因芯片檢測方法的建立[J]. 高興,辛文文,高姍,康琳,王景林. 生物技術(shù)通報. 2013 (12)
[9]中草藥在奶牛乳房炎防治中的應(yīng)用[J]. 梁鳳華. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2013(01)
[10]奶牛乳房炎的研究進(jìn)展[J]. 畢海林,唐達(dá),唐建華. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2012(21)
博士論文
[1]金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶的功能鑒定及表達(dá)調(diào)控[D]. 胡瑜.上海交通大學(xué) 2013
碩士論文
[1]四種豬冠狀病毒多重RT-PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[D]. 楊艷楠.吉林大學(xué) 2018
[2]山東某規(guī)模化奶牛場乳房炎流行病學(xué)調(diào)查[D]. 韓書娟.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]奶山羊乳房炎病原菌分離鑒定及多重PCR檢測方法建立[D]. 謝曉艷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]奶水牛乳房炎致病菌的分離鑒定及多重PCR檢測方法的建立[D]. 馬麟.廣西大學(xué) 2015
[5]河北省不同地區(qū)奶牛乳房炎主要病原菌的分離鑒定和耐藥性研究[D]. 張月.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[6]多重PCR檢測牛肉中沙門氏菌、單增李斯特菌和大腸桿菌O157：H7的研究[D]. 宋東曉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]奶牛鏈球菌性乳房炎可視化LAMP檢測方法的建立及應(yīng)用[D]. 賀婷.廣西大學(xué) 2014
[8]奶牛乳房炎致病菌分離鑒定及快速診斷試劑盒的研發(fā)與應(yīng)用[D]. 陳亞明.廣西大學(xué) 2014
[9]六種牛源致病性細(xì)菌多重PCR檢測方法的建立[D]. 劉曉丹.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[10]奶牛乳房炎病原菌分離鑒定及其多重PCR檢測方法的建立[D]. 聶培.廣西大學(xué) 2013
本文編號：2912235
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