發(fā)布時間：2020-12-12 22:12

　　豬德爾塔冠狀病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCoV）屬于冠狀病毒科,δ冠狀病毒屬成員,是一種新型腸道冠狀病毒,可引起不同日齡的豬只感染并表現出腹瀉、嘔吐、脫水的臨床癥狀。疫苗免疫,尤其是母豬的被動免疫是預防和控制腹瀉性病毒（PEDV、TGEV、PoRV和PDCoV）感染最有效的方法。目前,PDCoV缺少商品化的疫苗,對疫病的防控無疫苗可用。因此,滅活疫苗的制備及免疫評價對PDCoV的防控顯得尤為重要。本研究首先在5日齡SPF豬上對PDCoV分離株PDCoV NH P10的致病性進行研究,結果表明以10⁴ TCID₅₀口服感染1 mL病毒,攻毒后24 h,出現典型的腹瀉的臨床癥狀。剖檢顯示腸壁變薄,內有淡黃色液體。病理切片HE染色表明,空腸和回腸的腸絨毛在感染后72 h出現明顯的萎縮、變短和脫落。空腸和回腸是PDCoV感染的主要腸段。與文獻報道不同的是PDCoV NH株感染后沒有出現嘔吐的臨床癥狀。同時,本研究在豬回腸細胞系IPI-2I細胞上研究了PDCoV入侵細胞的分子機制,結果表明PDCoV可以通過兩種途徑感染細... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數】：112 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

冠狀病毒電鏡照片（NCBISARSsource）

學位論文 N 蛋白與核糖體亞基或核仁蛋白相互作用而發(fā)揮功能的(Le的棘突蛋白 S，其功能與其它冠狀病毒 S 相似，在病毒與細胞揮重要作用(Shang et al.,2018)。同時，S 蛋白也決定了病毒和抗體的主要抗原。因此，在冠狀病毒的疫苗設計中，S 蛋和 N 基因之間，編碼了一個非結構蛋白 NS6，其功能為拮抗逃逸的功能(Fang et al.,2016;Fang et al.,2018)。在 N 基因中同時但具體功能還不清楚(Fang et al.,2017;Koonpaew et al.,2019;Z

學位論文 D22 (DC44) 株(Hu et al.,2015)。國內陳建飛等人用 LLC-PK 細分離到 PDCoV NH 株。在病毒的分離和培養(yǎng)過程中，病毒的酶可以顯著提高病毒在傳代過程中的病毒滴度。然而有研究表C-PK 細胞上復制但是沒有細胞病變，并且病毒滴度比添加胰制不是必須的但胰酶的添加有助于病毒在 LLC-PK 細胞上復制 LLC-PK 細胞略有不同，胰酶并不能促進 PDCoV 在 ST 細胞上續(xù)傳代需要添加胰液素或來源于無菌仔豬的小腸內容物。在 P中添加胰酶和 ST 細胞中添加胰液素，病毒產生相似的致細胞細胞變大、變圓、部分細胞出現細胞融合、細胞皺縮脫落現象l.,2016)。胰酶或胰液素在病毒分離和傳代中的作用現在還不清毒入侵細胞過程中，S 蛋白的切割對于病毒的感染至 et al.,1999)。當 S 蛋白被細胞內的蛋白酶或外源添加的胰酶切促進病毒的囊膜和細胞膜融合，病毒基因組才能釋放到細胞子。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]同時檢測PEDV和TGEV及PDCoV的多重RT-PCR方法的建立及初步應用[J]. 任玉鵬,張斌,湯承,曹恭貌,岳華.  中國獸醫(yī)科學. 2016(06)
[2]新現豬Delta冠狀病毒RT-PCR檢測方法的建立及其應用[J]. 張帆帆,宋德平,周信榮,黃冬艷,李安琪,彭棋,陳燕君,吳瓊,何后軍,唐玉新.  中國農業(yè)科學. 2016(07)
[3]豬流行性腹瀉病毒的分離培養(yǎng)與鑒定[J]. 錢永清,聞人楚,唐永蘭,孫智鋒.  上海農業(yè)學報. 1999(02)
[4]豬傳染性胃腸炎與豬流行性腹瀉穴位針刺免疫的研究[J]. 王明,馬思奇,周金法,于文濤,魏鳳祥,崔現蘭,馮力,佟有恩,李偉杰,張為民,唐麗萍,黃慶州,孟憲松.  中國畜禽傳染病. 1997(06)



本文編號：2913365