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豬流感病毒GX18ca株免疫反應(yīng)特性研究

發(fā)布時(shí)間:2025-06-04 01:11
  豬流感(swine influenza,SI)的病原通常為正粘病毒科、流感病毒屬的A型流感病毒,可引起豬高熱、咳嗽和呼吸困難等癥狀,該病發(fā)病率高、病死率低,所以并沒(méi)有引起人們對(duì)豬群免疫的重視。研究發(fā)現(xiàn),豬呼吸道上皮細(xì)胞既含有人流感病毒受體又含有禽流感病毒受體,這意味著人流感和禽流感都能傳播給豬,而豬流感也能傳播給人和禽類(lèi)。因此,做好豬流感的防護(hù)工作對(duì)阻止流感病毒的跨種間屏障傳播、阻擊流感全球范圍內(nèi)大流行、維護(hù)公共衛(wèi)生方面意義重大。目前控制和預(yù)防流感流行與傳播的主要手段是疫苗接種,市面上使用的疫苗以滅活疫苗為主,滅活疫苗的安全度高,特異性較強(qiáng),同時(shí)存在生產(chǎn)周期長(zhǎng)、生產(chǎn)工序復(fù)雜、不易產(chǎn)生局部免疫反應(yīng)等缺點(diǎn)。在免疫學(xué)上冷適應(yīng)減毒流感疫苗要優(yōu)于滅活疫苗,通過(guò)鼻腔途徑免疫,可誘導(dǎo)粘膜免疫、體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng),產(chǎn)生交叉免疫保護(hù)力,對(duì)異源病毒的攻擊提供有效保護(hù)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)豬流感病毒EA H1N1亞型GX18ca株在適宜溫度和限制溫度下EID50的比較,鑒定出具有其冷適應(yīng)和溫度敏感特性;對(duì)全基因組測(cè)序發(fā)現(xiàn),與親本野生型毒株相比,GX18ca株共有六個(gè)位點(diǎn)發(fā)生氨基酸變化,分布在...

【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1親本毒株和冷適應(yīng)毒株在MDCK細(xì)胞上的生長(zhǎng)曲線A:SW/GX/18/11毒株生長(zhǎng)曲線B:GX18ca毒株生長(zhǎng)曲線

圖2-1親本毒株和冷適應(yīng)毒株在MDCK細(xì)胞上的生長(zhǎng)曲線A:SW/GX/18/11毒株生長(zhǎng)曲線B:GX18ca毒株生長(zhǎng)曲線

兩株病毒以相同劑量分別接種到MDCK細(xì)胞中,接種后,第24h、48h、72h收集細(xì)胞上清,測(cè)定其在30℃、33℃、37℃、39℃四種不同溫度下的TCID50,并利用GraphPadPrism6軟件作圖繪制生長(zhǎng)曲線(圖2-1),結(jié)果顯示,SW/GX/18/11在37℃和....


圖2-2親本毒株和冷適應(yīng)毒株引起的小鼠體重變化和臟器滴定結(jié)果比較A:臟器滴定B:體重變化

圖2-2親本毒株和冷適應(yīng)毒株引起的小鼠體重變化和臟器滴定結(jié)果比較A:臟器滴定B:體重變化

用106EID50/50μL劑量感染小鼠,在攻毒三天后每組剖殺3只小鼠,對(duì)鼻甲和肺臟病毒滴定,結(jié)果顯示,冷適應(yīng)疫苗株GX18ca感染組的小鼠鼻甲檢測(cè)不到病毒復(fù)制,肺臟中檢測(cè)到了較低含量的病毒,肺臟中病毒滴度為2.67±0.72Log10EID50/mL,而SW/GX/18/1....


圖2-3親本毒株和冷適應(yīng)毒株引起的肺臟病理變化結(jié)果比較

圖2-3親本毒株和冷適應(yīng)毒株引起的肺臟病理變化結(jié)果比較

為了觀察小鼠感染病毒后的肺臟的病變程度,我們采集小鼠肺臟,在4%多聚甲醛中固定,然后做病理切片、HE染色后,鏡檢結(jié)果(圖2-3),在野生型病毒SW/GX/18/11攻毒組中,第3天小鼠的肺臟組織病變范圍約70%,表現(xiàn)出中度的出血性肺炎(圖2-3A);在GX18ca攻毒組中,第3....


圖3-3 HA基因進(jìn)化樹(shù)

圖3-3 HA基因進(jìn)化樹(shù)

為了進(jìn)一步闡明GX18ca與SW/GX/18/11、SW/LN/972/16、SC/1/09的遺傳進(jìn)化關(guān)系,對(duì)各種H1N1亞型的SIV的HA序列進(jìn)行比對(duì),繪制遺傳進(jìn)化樹(shù)。從圖3-1HA基因的遺傳進(jìn)化樹(shù)可以看出,主要分為EAH1N1、CSH1N1兩個(gè)大的分支。GX18ca與S....



本文編號(hào):4049091

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