發(fā)布時(shí)間：2020-11-21 15:20

　　 目的： 研究超順磁性氧化鐵粒子(superparamagnetic iron oxide particles, SPIO)體外標(biāo)記SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)的可行性及其對SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)生物學(xué)活性的影響。 研究超順磁性氧化鐵粒子(superparamagnetic iron oxide particles, SPIO)體外標(biāo)記的SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)在3.0T磁共振儀下進(jìn)行細(xì)胞成像示蹤的可行性。 方法： 1、從SD大鼠骨髓中分離培養(yǎng)及鑒定MSCs。 2、體外不同濃度SPIO聯(lián)合多聚賴氨酸標(biāo)記,未標(biāo)記細(xì)胞設(shè)為對照組。普魯士藍(lán)染色和電鏡檢查鑒定細(xì)胞內(nèi)鐵顆粒。 3、臺(tái)盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞存活。 4、磁標(biāo)記MSCs轉(zhuǎn)入成脂肪、成骨培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)后進(jìn)行鑒定。 5、應(yīng)用3.0T磁共振儀h2d1_154掃描序列和tseBR2d1_16掃描序列對磁標(biāo)記細(xì)胞進(jìn)行成像。 結(jié)果： 1、普魯士藍(lán)染色和電鏡檢查顯示細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含致密鐵顆粒。 2、臺(tái)盼藍(lán)染色表明磁標(biāo)記對MSCs活性無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 3、標(biāo)記細(xì)胞可正常進(jìn)行成脂肪、成骨細(xì)胞分化。 4、h2d1_154序列和tseBR2d1_16序列提示與未標(biāo)記細(xì)胞信號強(qiáng)度(SI)相比,1×106/ml標(biāo)記細(xì)胞、5×105/ml標(biāo)記細(xì)胞SI均顯著性下降(P0.05),兩序列的信號強(qiáng)度衰減率(△SI)顯著高于未標(biāo)記組(P0.05)。在兩個(gè)序列中1×106/ml標(biāo)記細(xì)胞△SI均高于5×105/ml標(biāo)記細(xì)胞△SI,但不具有顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論：SPIO聯(lián)合多聚賴氨酸能成功標(biāo)記MSCs,磁標(biāo)記對細(xì)胞活性及潛在分化能力無影響。磁標(biāo)記細(xì)胞在MR上產(chǎn)生特征性的低信號改變。應(yīng)用3.0TMR成像示蹤標(biāo)記細(xì)胞可行,tseBR2dl_16序列、h2d1_154序列成像均可獲得良好效果。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類】：R445.2
【部分圖文】：

G:培養(yǎng)的細(xì)胞組CD452、磁標(biāo)記MSCs的鑒定標(biāo)記細(xì)胞行普魯十藍(lán)染色觀察到MSCS細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見陽性籃色致密顆粒分布。顯微鏡下分別計(jì)數(shù)三組細(xì)胞的藍(lán)染細(xì)胞比例，12.5、25.0、37.5u留ml組MSCs的磁化標(biāo)記有效率分別為92.6%士4.7%、97.8%士2.1%、98.2%士1.8%，而未標(biāo)記的MSCs普魯士監(jiān)染色未觀察到藍(lán)染顆粒，呈陰性。(圖ZA、B)

(A、B)、SPIO標(biāo)記后MSCs成骨分化
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2893203