發(fā)布時間：2020-12-11 23:57

　　目的探索erb-b2受體酪氨酸激酶3（HER-3）對卵巢癌耐藥細胞株SKOV3/H的體外增殖和體內(nèi)成瘤能力的影響。方法采用赫賽汀濃度遞增法構(gòu)建SKOV3耐藥細胞株（赫賽汀起始濃度為5 mg/L,經(jīng)5⁸次濃度遞增,每次提高50%）。實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測HER-3在15對非耐藥卵巢癌組織和耐藥卵巢癌組織中的表達（SKOV3和SKOV3/H細胞中的表達）。MTT實驗驗證分別轉(zhuǎn)染sh-HER-3及其對照質(zhì)粒vector對SKOV3/H細胞增殖能力的影響。將包含sh-HER-3的重組慢病毒質(zhì)粒及其陰性對照慢病毒空載體質(zhì)粒vector（均帶egfp熒光標簽）分別以病毒/細胞數(shù)量=15的比例感染SKOV3/H細胞,加入2.0μg/ml的嘌呤霉素篩選,構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染sh-HER-3或vector的SKOV3/H細胞,將2株細胞分別注射到裸鼠皮下,復(fù)制卵巢癌裸鼠移植瘤模型,觀察體內(nèi)成瘤情況。結(jié)果成功構(gòu)建卵巢癌SKOV3耐赫賽汀細胞株SKOV3/H,且SKOV3/H的群體倍增時間為SKOV3細胞的1.4¹.9倍。HER-3在耐藥卵巢癌組織... 

【文章來源】：中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志. 2017年15期 第22-28頁 北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要材料
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 穩(wěn)定表達sh-HER-3重組慢病毒質(zhì)粒及其對照質(zhì)粒載體細胞株的建立
    1.4 臨床樣本及RNA提取
    1.5 實時熒光定量聚合酶連反應(yīng)檢測
    1.6 細胞生長曲線繪制
    1.7 MTT實驗
    1.8 裸鼠移植瘤模型
    1.9 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 赫賽汀誘導(dǎo)卵巢癌細胞株生長情況
    2.2 HER-3在卵巢癌耐藥組織和細胞系中的表達
    2.3 靶向HER-3抑制卵巢癌細胞株SKOV3/H的增殖能力
    2.4 靶向HER-3抑制卵巢癌細胞株SKOV3/H的體內(nèi)成瘤能力
3 討論



本文編號：2911460