ERK1/2信號通路的活化參與人臍靜脈內(nèi)皮細胞向間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化的過程
發(fā)布時間:2024-06-13 21:50
目的建立人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)向間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化的模型并探討其可能的信號轉(zhuǎn)導途徑。方法以HUVECs為研究對象,分組如下:對照組、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)模型組、TGF-β1+DMSO組以及TGF-β1+抑制劑干預組。TGF-β1模型組應用5ng/mL TGF-β1刺激HUVECs 72h;TGF-β1+DMSO組應用5ng/mL TGF-β1及1μL/mL DMSO刺激HUVECs 72h;TGF-β1+抑制劑干預組分別應用p38MAPK抑制劑SB203580(5mmol/L)或ERK抑制劑U0126(10mmol/L)或JNK抑制劑SP600125(5mmol/L)干預TGF-β1誘導的內(nèi)皮細胞,倒置顯微鏡觀察內(nèi)皮細胞形態(tài),應用免疫熒光法檢測VE-鈣粘蛋白(VE-cadherin)和α-肌動蛋白(α-SMA)在細胞內(nèi)的分布情況;并應用Western blot法檢測VE-cadherin和α-SMA的蛋白表達情況。結(jié)果 TGF-β1(5ng/mL)刺激HUVECs 72h后,內(nèi)皮細胞形態(tài)由卵圓形鋪路石狀向梭形轉(zhuǎn)變,與0h相比,VE-cadherin蛋白表達顯著下調(diào)(P...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 細胞培養(yǎng)和干預
1.3 Western blot法檢測細胞蛋白表達
1.4 免疫熒光法檢測細胞蛋白表達
1.5 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
2.1 TGF-β1可誘導HUVECs向間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化
2.2 p38 MAPK的活化對EndoMT的影響
2.3 JNK的活化對EndoMT的影響
2.4 ERK1/2的活化對EndoMT的影響
3 討論
本文編號:3993693
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1 材料和方法
1.1 材料
1.2 細胞培養(yǎng)和干預
1.3 Western blot法檢測細胞蛋白表達
1.4 免疫熒光法檢測細胞蛋白表達
1.5 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
2.1 TGF-β1可誘導HUVECs向間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化
2.2 p38 MAPK的活化對EndoMT的影響
2.3 JNK的活化對EndoMT的影響
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