發(fā)布時間：2025-03-18 23:27

　　LL-37是人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的抗菌肽Cathelicidin家族的唯一成員，由37個氨基酸殘基組成，因其N端前兩個氨基酸殘基為亮氨酸（L）而得名。LL-37抗菌譜廣，體外研究顯示對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌、病毒均發(fā)揮抑制作用，特別是對部分臨床耐藥菌及臨床易感菌株也有較強(qiáng)的抑菌活性，因此有很好的應(yīng)用前景。本文采用原核表達(dá)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)小分子抗菌多肽LL-37的可溶表達(dá)，并研究其在皮膚創(chuàng)傷感染中發(fā)揮的活性作用。本課題將LL-37連接入pET32a載體中進(jìn)行可溶表達(dá)，通過考察表達(dá)誘導(dǎo)因素獲得高產(chǎn)量的LL-37，體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其抗菌活性，最后研究LL-37對于小鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）感染的預(yù)防治療作用，并從抗細(xì)菌生物膜方面探討其作用機(jī)制。 研究目的： 本文主要是采用pET32a表達(dá)載體實(shí)現(xiàn)LL-37的可溶表達(dá)，同時還探討了LL-37對于小鼠深Ⅱ度燙傷耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）創(chuàng)傷感染模型的預(yù)防治療作用，并對其機(jī)制進(jìn)行初步研究，為小分子抗菌肽的基因工程表達(dá)提供參考，也為LL-37的深入研究和開發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法： 1.融合蛋白Trx-L...

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1Cathelicins家族結(jié)構(gòu)示意圖

2圖1.1Cathelicins家族結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1.1Schematicrepresentationofthecathelicidinfamily

圖1.2LL-37殺菌模式示意圖

圖1.2LL-37殺菌模式示意圖ig.1.2SchematicrepresentationofLL-37bactericidalmod-37作為Cathelicidin家族唯一一個人源抗菌肽，修復(fù)中發(fā)揮了重要作用，受到越來越多學(xué)者的關(guān)

圖2.2融合蛋白Trx-LL-37疏水性分析

（3）疏水性預(yù)測結(jié)果用ProtScaleServer進(jìn)行親水性/疏水性分析，正值越大表示越疏水，負(fù)值越大表示越親水，而介于+0.5到-0.5之間為兩性氨基酸。結(jié)果（圖2.2）顯示，多肽鏈第146位的Met親水性最強(qiáng)（-2.467），第26位的Val疏水性最強(qiáng)（1....

圖2.3目的基因LL-37的PCR擴(kuò)增M：DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DL2000；1：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物

圖2.3目的基因LL-37的PCR擴(kuò)增A分子量標(biāo)準(zhǔn)DL2000；1：PCR擴(kuò)Fig2.3PCRamplificationofLL-37:DNAMarkerDL2000;1:PCRpro-LL-37的鑒定化成功的單克隆菌落作為模板與預(yù)期的....

本文編號：4036340