發(fā)布時間：2020-11-08 16:27

　　 目的初步探討不同濃度的順鉑(Cisplatin,DDP),對腎母細胞瘤瘤株的抑制作用,為相關的動物實驗提供前期工作和一定的理論依據(jù)。方法1.CCK-8法檢測細胞增殖活力:在96孔板上培養(yǎng)兩癌株(SK-NEP-1/G401),按加入順鉑的量將癌株分為6組,于24,48,72h后加入CCK-8,測量其在450nm處的光密度(OD值),并進行統(tǒng)計學分析2.劃痕實驗檢測細胞遷移能力:在24孔板上培養(yǎng)兩癌株,按加入順鉑的量將癌株分為6組,用槍頭比著直尺垂直劃線,于0,24,48h觀察細胞的遷移情況,拍照細胞遷移情況,計算劃痕愈合率%=(0 h劃痕區(qū)域像素-24、48 h劃痕區(qū)域像素)/0 h劃痕區(qū)域像素x100%,并進行統(tǒng)計學分析3.蛋白質免疫印跡(WB)測BAX蛋白含量:按加入順鉑的量將癌株分為6組,提取總蛋白,再用Western blot技術檢測各組內(nèi)的Bax蛋白和β-Actin蛋白的含量,計算Bax蛋白相對量,并進行統(tǒng)計學分析結果1.在接種細胞后的第24,48,72h,未加入順鉑組(0%組)的SKNEP-1/G401細胞在A450處OD值明顯高于加入順鉑組(0.1%,0.2%,0.4%,0.8%及1.6%組)(p0.001),順鉑對SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。2.在接種細胞后的第0,24,48h,順鉑對SK-NEP-1/G401細胞在24h及48h的劃痕愈合率具有明顯差異(p0.001),順鉑對SK-NEP-1遷移能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。3.順鉑影響后Bax表達增加,0.2%組和0,4%組與對照組相比差異明顯(p0.001),順鉑引起SK-NEP-1中Bax蛋白明顯增加的濃度為0%~0.2%;0.4%組與對照組相比差異明顯(p0.001),0.2%組與0.4%組之間差異明顯(p0.001),順鉑引起G401中Bax蛋白明顯增加的濃度為0.2%~0.4%.結論1.順鉑能夠抑制腎母細胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株增殖能力,順鉑對SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。2.順鉑能夠抑制腎母細胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株遷移,順鉑對SKNEP-1遷移能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。3.順鉑能夠促進Bax蛋白的表達,可能是誘導細胞凋亡和癌行為能力降低的原因;順鉑引起SK-NEP-1中Bax蛋白明顯增加的濃度為0%~0.2%,順鉑引起G401中Bax蛋白明顯增加的濃度為0.2%~0.4%。4.順鉑對腎母細胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株的抑制作用存在平臺期
【學位單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R737.11
【部分圖文】：

經(jīng)不同濃度順鉑影響后各組腎母細胞瘤的增殖能力。根據(jù)兩株細胞株的 CCK-8 實驗結果,繪制細胞增殖曲線(A:SK-NEP-1;B:G401),在接種細胞后的第 1，2，3 天，未加入順鉑組(0％組)的 SK-NEP-1/G401 細胞在 A450 處 OD 值明顯高于加入順鉑組(0.1％，0.2％，0.4％，0.8％及 1.6％組),差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.001)，提示順鉑能抑制腎母細胞瘤的增殖能力。A 中第 2 和 3 天，0.4％，0.8％及 1.6％組差異無統(tǒng)計學意義(p=0.115 和 p=0.499)，且 0.4％組與 0.2％組差異存在統(tǒng)計學意義(p=0.004和 p=0.003),提示順鉑對 SK-NEP-1 的增殖能力的最大抑制濃度為 0.2％～0.4％。B中各天中，0.4％，0.8％及1.6％組差異無統(tǒng)計意義(p=0.607，p=0.635，和 p=0.778)，且 0.4％組與 0.2％組差異存在統(tǒng)計學意義(p＜0.001，p=0.006和 p=0.001),提示順鉑對 G401 的增殖能力的最大抑制濃度為 0.2％～0.4％。

順鉑對腎母細胞瘤細胞株體外影響的初步研究 2016 級研究生碩士論文驗驗證順鉑影響后 SK-NEP-1/G401 細胞遷移能力的改變。劃痕實驗結果(A，C:SK-NEP-1;B，D:G401)，順鉑對 SK-NEP-1/G401 細胞在 24h 及 48h 的劃痕愈合率具有明顯的統(tǒng)計學意義(p＜0.001)，提示順鉑能夠減弱腎母細胞瘤細胞遷移能力。A,C 中 24h 和 48h，0.4％，0.8％及 1.6％組差異無統(tǒng)計意義(p=0.945 和 p=0.901)，且 0.4％組與 0.2％組差異存在統(tǒng)計學意義(p＜0.001和 p＜0.001),提示順鉑對 SK-NEP-1 遷移能力的最大抑制濃度為 0.2％～0.4％。

瘤細胞株體外影響的初步研究 2016 級研提示順鉑引起 SK-NEP-1 中 Bax 蛋白明顯增加的濃401 中 0.2 ％ 組 和 0.4 ％ 組 分 別 上 升 了 (1.053)％，0.2％組與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義(p=0比差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.001),及 0.2％組與 0.4 組(p＜0.001)，提示順鉑引起 G401 中 Bax 蛋白明顯增％.
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本文編號：2875032