發(fā)布時(shí)間：2020-06-13 04:50

【摘要】：目的:國(guó)內(nèi)外研究表明鎂缺乏與帕金森病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),我們的前期研究證明了L-蘇糖酸鎂(Magnesium-L-threonate,Mg T)可以改善帕金森病1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)小鼠模型行為學(xué)障礙,并減少多巴胺神經(jīng)元進(jìn)行性缺失,但是L-蘇糖酸鎂對(duì)MPTP小鼠的保護(hù)機(jī)制尚不明確。已知在MPTP毒性損傷機(jī)制中,炎癥和氧化應(yīng)激在多巴胺神經(jīng)元損傷過程中發(fā)揮重要作用,因此,本研究主要探討口服Mg T后,MPTP小鼠黑質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞活化和i NOS的變化。方法:本實(shí)驗(yàn)使用C57BL/6J小鼠(雄性,18-22g),稱重后隨機(jī)分為3組:正常對(duì)照組,MPTP模型組(腹注,連續(xù)7天,日一次,30mg/kg)和L-蘇糖酸鎂治療組(口服Mg T+腹注MPTP,Mg T 1.2m M)。分別于腹腔注射MPTP后第1天及第7天,對(duì)小鼠進(jìn)行處死取腦,評(píng)價(jià)Mg T對(duì)MPTP小鼠模型的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制,主要通過三個(gè)方面進(jìn)行評(píng)價(jià):1、多巴胺神經(jīng)元的形態(tài)與數(shù)目改變:通過Kluver Barrer法和酪氨酸羥化酶(Tyrosine Hydroxylase,TH)免疫染色法觀察Mg T對(duì)MPTP小鼠黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元的形態(tài)和數(shù)目的影響;2、通過離子鈣接頭蛋白(Ionized calciumbingding adaptor molecule-1,Iba-1)免疫組織化學(xué)染色探討Mg T對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響;3、通過誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)免疫組織化學(xué)染色,評(píng)價(jià)Mg T對(duì)MPTP小鼠黑質(zhì)致密部i NOS表達(dá)的影響。結(jié)果:1、Kluver Barrer染色觀察發(fā)現(xiàn),對(duì)照組細(xì)胞核大深染,卵圓形,位于胞體中央,核仁明顯,胞體呈梭形或三角形;與對(duì)照組相比,模型組黑質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞胞核染色變淺,胞體萎縮,胞漿減少;與模型組相比,Mg T治療組神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目增加,核染色較深,胞體體積增大。TH免疫組化染色提示與對(duì)照組(66±11)相比,MPTP模型組小鼠黑質(zhì)致密部TH陽性神經(jīng)元數(shù)目(27.3±8)明顯減少,Mg T治療組TH陽性神經(jīng)元數(shù)目(54.7±4.6)與MPTP模型組相比,神經(jīng)元數(shù)目顯著增加(P0.05)。2、小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物Iba-1陽性細(xì)胞的活化:與對(duì)照組(0.0±0.0)相比,MPTP模型組小鼠黑質(zhì)活化的Iba-1免疫陽性細(xì)胞數(shù)量(14.7±3.3)明顯增加(P0.05),細(xì)胞體積增大,突起增粗;Mg T治療組小鼠黑質(zhì)區(qū)域的活化Iba-1陽性細(xì)胞數(shù)目(6.6±4.8)與MPTP組相比減少55.1%,P0.05。3、Mg T對(duì)i NOS蛋白表達(dá)影響的評(píng)價(jià):與對(duì)照組相比,MPTP模型組小鼠黑質(zhì)致密部區(qū)i NOS陽性細(xì)胞數(shù)(17.3±5.1)明顯升高,P0.01;與MPTP模型組比較,Mg T治療組小鼠黑質(zhì)區(qū)i NOS陽性細(xì)胞(9.3±1.5)減少46.2%(P0.01)。結(jié)論:1、口服L-蘇糖酸鎂可以改善MPTP毒性引起的多巴胺神經(jīng)元的形態(tài)改變及數(shù)目減少。2、L-蘇糖酸鎂可以降低MPTP引起的小鼠黑質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化和i NOS蛋白的表達(dá),提示L-蘇糖酸鎂可能是通過抑制膠質(zhì)細(xì)胞活化引起的炎癥反應(yīng)和減少氧化應(yīng)激,對(duì)MPTP小鼠的多巴胺神經(jīng)元缺失產(chǎn)生保護(hù)作用。
【圖文】：

- 24 -圖1 小鼠腦底觀模式圖Figure1 The schematic view of a mouse’s brain tissue圖2 黑質(zhì)斷面模式圖（冠狀斷Bregma - 3.08mm 至- 3.52mm）Figure2 The schematic view of substantia nigra（coronal section bregma -3.08mm to -3.52mm）

圖1 小鼠腦底觀模式圖Figure1 The schematic view of a mouse’s brain tissue圖2 黑質(zhì)斷面模式圖（冠狀斷Bregma - 3.08mm 至- 3.52mm）Figure2 The schematic view of substantia nigra（coronal section bregma -3.08mm to -3.52mm）
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R742.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2710678