發(fā)布時間：2025-06-23 22:34

　　背景和目的：腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率高、死亡率高、預(yù)后差,嚴(yán)重危害人類的健康,而膠質(zhì)瘤的侵襲是臨床治療效果提高的重要障礙。因此,闡明其發(fā)病機(jī)理、尋找新的生物學(xué)標(biāo)記物及治療靶標(biāo)以提高治療效果已成為亟待解決的重大課題。腫瘤微環(huán)境是近年來腫瘤學(xué)研究的熱點(diǎn),腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的維持需要其所在的微環(huán)境提供支撐。腫瘤微環(huán)境包括腫瘤間質(zhì)細(xì)胞創(chuàng)造的微環(huán)境和腫瘤細(xì)胞自身通過旁分泌或自分泌創(chuàng)造的微環(huán)境,本課題將以低惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞A172和高惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87為研究模型,觀察分泌型蛋白CCN3在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的作用并初步探討可能的分子機(jī)制。 方法：(1)用實(shí)時熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測A172和U87細(xì)胞中CCN3的表達(dá)情況,同時用ELISA檢測A172和U87細(xì)胞培養(yǎng)上清液中CCN3的蛋白含量；(2)用人CCN3重組蛋白刺激A172細(xì)胞,用MTS試驗(yàn)觀察細(xì)胞的增殖情況,Transwell試驗(yàn)觀察CCN3刺激前后A172細(xì)胞及U87細(xì)胞的侵襲能力；(3)用NF-κB活性檢測報告基因?qū)嶒?yàn)檢測CCN3刺激前后A172細(xì)胞及U87細(xì)胞中的NF-κB的活性,同時用western blot檢測相關(guān)細(xì)胞...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞系及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        2.1.2 實(shí)時定量PCR相關(guān)試劑
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 試劑的配制
    2.2 方法
        2.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代、凍存
        2.2.2 實(shí)時熒光定量PCR(Real-time PCR,qRT-PCR)
        2.2.3 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)
        2.2.4 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 NF-κB活性檢測
        2.2.7 Western blot
        2.2.8 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 CCN3在膠質(zhì)瘤A172細(xì)胞中的表達(dá)明顯低于U87細(xì)胞
    3.2 CCN3增加A172細(xì)胞的侵襲能力
    3.3 CCN3活化A172細(xì)胞中的PI3K/Akt/NF-κB信號通路
    3.4 抑制PI3K/Akt/NF-κB信號通路逆轉(zhuǎn)CCN3的侵襲誘導(dǎo)作用
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：4052096