發(fā)布時間：2018-06-13 13:14

  本文選題：環(huán)介導(dǎo)等溫擴增 + 單純皰疹病毒��； 參考：《南華大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的:建立單純皰疹病毒(Herpes Simple Virus)Ⅰ型和Ⅱ型、人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus)6型和11型的LAMP檢測方法。 方法:分別設(shè)計擴增各型病毒特異基因的LAMP引物,提取病毒DNA,配置LAMP反應(yīng)體系,60～65℃保溫約60 min,完成對靶病原體基因的擴增,肉眼及電泳判定擴增結(jié)果。LAMP擴增產(chǎn)物經(jīng)酶切進一步鑒定;設(shè)立對照組,評價LAMP方法的特異性;10倍系列稀釋模板,檢測LAMP技術(shù)的敏感性。 結(jié)果:實驗組經(jīng)LAMP后,肉眼觀察到LAMP擴增產(chǎn)物的出現(xiàn),電泳后呈LAMP特征性梯狀條帶,對照組均無擴增產(chǎn)物;HSV及HPV LAMP擴增產(chǎn)物經(jīng)相應(yīng)限制性內(nèi)切酶酶切鑒定正確,特異性實驗結(jié)果顯示與對照組無交叉反應(yīng),具有特異性;LAMP可檢測到單純皰疹病毒Ⅰ型、單純皰疹病毒Ⅱ型、人乳頭瘤病毒6型、人乳頭瘤病毒11型DNA的最低濃度分別是1 pg/μL、10 pg/μL、1 pg/μL、1 pg/μL,其敏感性與PCR相當。 結(jié)論:建立了檢測單純皰疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型、人乳頭瘤病毒6型和11型的LAMP檢測方法,實驗結(jié)果顯示該法特異和敏感,有望用于臨床檢測。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the detection of herpes simplex virus (Herpes simple virus) type 鈪，

本文編號：2014138