發(fā)布時間：2020-12-02 16:21

　　β-內(nèi)酰胺抗生素的生產(chǎn)正經(jīng)歷一場從化學法制備向酶法制備轉(zhuǎn)變的技術變革。青霉素G�；�酶（Penicillin G acylase, PGA）在酶法制備技術中處于核心地位。提高PGA的合成活力將推進β-內(nèi)酰胺抗生素的酶法合成。目前基因序列已知的PGA分別來源于革蘭氏陰性菌 （Alcaligenes faecalis （Af）, Escherichia coli （Ec）, Kluyvera citrophila （Kc）, Providencia rettgeri （Pr））以及革蘭氏陽性菌（Bacillus megaterium （Bm） , Arthrobacter viscosus）。同屬革蘭氏陰性菌或者革蘭氏陽性菌的PGA同源性較高，酶學性質(zhì)接近。利用定向進化技術對pga基因進行隨機突變和同源重組，有望獲得具有更高合成活力和更高穩(wěn)定性的新突變酶。論文第一章構建了PGA的枯草芽孢桿菌分泌表達系統(tǒng)�？寺×藖碓从贏lcaligenes faecalis （CICC AS1.767）的pga基因（Genbank 登錄號AF455356），該基因在枯草芽孢桿菌中實現(xiàn)了分泌表達。表達量較野生型... 

【文章來源】：中國科學院大學(中國科學院上海生命科學研究院)上海市

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
引言
參考文獻
第一章 Alcaligenesfaecalis青霉素G�；�酶基因在枯草芽孢桿菌中的分泌表達、純化和性質(zhì)研究
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
第二章 不同表達元件對枯草芽孢桿菌分泌表達青霉素G�；�酶的影響
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
第三章 突變Providenciarettgeri青霉素G�；�酶基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
第四章 青霉素G酰化酶的噬菌體展示
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
第五章 DNA重排技術提高青霉素G�；�酶的合成活力
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
結論
參考文獻
附錄在學期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]雷氏普羅威登斯菌青霉素G�；�酶基因在大腸桿菌中的克隆與表達[J]. 周政,張愛暉,周麗萍,楊晟,姜涌明,袁中一.  工業(yè)微生物. 2002(03)
[2]青霉素酰化酶活性中心的定點突變[J]. 戴明華,王恩多,謝雍,姜衛(wèi)紅,趙國屏.  生物化學與生物物理學報. 1999(05)
[3]巨大芽孢桿菌青霉素�；�酶在枯草桿菌中的表達及其分離純化[J]. 黃艷紅,袁中一,王應睞.  中國生物化學與分子生物學報. 1999(01)



本文編號：2895543