發(fā)布時間：2020-12-04 10:53

　　細(xì)胞培養(yǎng)是生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)研究領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)，目前，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)局限于靜態(tài)培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿等培養(yǎng)環(huán)境被廣泛應(yīng)用。然而，在正常生理條件下，一些細(xì)胞往往處在復(fù)雜的力學(xué)環(huán)境當(dāng)中，其中比較典型的是骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞等。由于這些細(xì)胞的生長環(huán)境，往往處在一個動態(tài)的環(huán)境當(dāng)中，細(xì)胞生長過程，會受到一些外界機(jī)械力的刺激。所以，建立一個動態(tài)的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境，具有非常重要的意義。微流控芯片技術(shù)，是近些年發(fā)展起來一門多元化技術(shù)。近年來較流行的芯片制作材料PDMS（聚二甲基硅氧烷，Polydimethylsiloxane）具有良好的光學(xué)通透性和透氣性等優(yōu)勢，利用PDMS制作的微流控芯片，也被廣泛的應(yīng)用到細(xì)胞培養(yǎng)中。由于PDMS還具有較好的彈性，作為貼壁生長細(xì)胞的基底材料，可以為細(xì)胞提供具有機(jī)械力加載的生長環(huán)境。本文開發(fā)研制了一種三層的PDMS微流控芯片，包括細(xì)胞生長層、薄膜形變層以及微通道控制層，選用血管內(nèi)皮細(xì)胞（EA.hy926）作為研究對象，實現(xiàn)了對血管內(nèi)皮細(xì)胞施加機(jī)械拉伸力的刺激。設(shè)計制作的多支流通道，滿足了實驗中，可以同時進(jìn)行不同應(yīng)變加載要求。本文設(shè)計的圓形細(xì)胞生長小室，可以經(jīng)過數(shù)學(xué)計算，... 

【文章來源】：沈陽工業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 研究背景及研究意義
        1.1.1 細(xì)胞動力學(xué)
        1.1.2 微流控芯片
    1.2 本研究國內(nèi)外現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢
    1.3 微流控芯片的應(yīng)用領(lǐng)域總結(jié)
    1.4 本文內(nèi)容
第二章 芯片的設(shè)計和參數(shù)
    2.1 機(jī)械拉伸芯片的原理
        2.1.1 聚二甲基硅氧烷的性能
        2.1.2 拉伸芯片的結(jié)構(gòu)設(shè)計
    2.2 芯片參數(shù)的計算
        2.2.1 裝置參數(shù)模型的建立
        2.2.2 流量與應(yīng)變公式推導(dǎo)
第三章 機(jī)械拉伸芯片的制作
    3.1 光刻掩膜的制作
        3.1.1 儀器與材料試劑
        3.1.2 具體操作步驟
        3.1.3 制作經(jīng)驗及重點注意事項
    3.2 二次固化法制作三層 PDMS 芯片
        3.2.1 儀器與材料試劑
        3.2.2 具體操作步驟及注意事項
第四章 芯片上細(xì)胞培養(yǎng)實驗
    4.1 實驗設(shè)計
    4.2 實驗方法
        4.2.1 顯微拍照直接觀察法
        4.2.2 MTT 法
        4.2.3 熒光染色法
    4.3 微流控芯片細(xì)胞培養(yǎng)實驗
        4.3.1 實驗儀器與試劑材料
        4.3.2 實驗步驟
        4.3.3 預(yù)實驗：PDMS 與 96 孔板細(xì)胞培養(yǎng)對照
    4.4 細(xì)胞拉伸實驗及結(jié)果
        4.4.1 EA.hy926 在不同作用時間下的活性對照
        4.4.2 EA.hy926 在不同應(yīng)變下的活性對照
第五章 結(jié)論
    5.1 本文結(jié)論
    5.2 課題展望
參考文獻(xiàn)
附錄 A SU-82035 光刻膠參數(shù)說明
附錄 B TS-2A 四通道注射泵參數(shù)
附錄 C 實驗藥品的配制
在學(xué)研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微流控芯片技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 姚琳,白亮,吳亮其,丁永勝.  中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2011(11)
[2]腫瘤細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞相互作用及丹參干預(yù)作用[J]. 陶麗,錢文慧,張蕾,阮君山,王愛云,陸茵.  中草藥. 2011(05)
[3]微流控芯片細(xì)胞實驗室[J]. 秦建華,劉婷姣,林炳承.  色譜. 2009(05)
[4]基于BioMEMS技術(shù)的樣品預(yù)處理微流控芯片研制[J]. 陳興,崔大付,劉長春,王利.  微納電子技術(shù). 2006(01)
[5]細(xì)胞生長與增殖的生物力學(xué)實驗研究進(jìn)展[J]. 曲華,吳文周,安美文,滕維中,趙永紅.  醫(yī)用生物力學(xué). 2004(01)
[6]微流控芯片操縱傳輸及實時監(jiān)測單細(xì)胞量子釋放[J]. 程偉,黃衛(wèi)華,龐代文,王宗禮,程介克,崔大付,屈三甫,鄭從義.  高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報. 2003(09)

博士論文
[1]周期性機(jī)械拉伸下人肺上皮細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的研究[D]. 張惠靜.重慶大學(xué) 2002
[2]周期性機(jī)械拉伸對大鼠成骨細(xì)胞生理活性和力學(xué)性質(zhì)的影響[D]. 唐麗靈.重慶大學(xué) 2002

碩士論文
[1]拉伸應(yīng)變對破骨細(xì)胞凋亡的影響及其作用機(jī)制的研究[D]. 郝慶新.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2012
[2]機(jī)械應(yīng)力影響鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞OPG/RANKLmRNA表達(dá)變化的研究[D]. 張曉聰.浙江大學(xué) 2007
[3]流體剪切力影響人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖與成骨分化的實驗研究[D]. 李洪鵬.第三軍醫(yī)大學(xué) 2005



本文編號：2897471