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大腸桿菌f2噬菌體多克隆抗體的研制及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2025-01-09 07:06
  大腸桿菌f2噬菌體是一種RNA病毒,其有些特性與腸道病毒極為相似,能像糞大腸菌群那樣在人和動(dòng)物的腸道中存在,且其在水中的存活時(shí)間、對(duì)氯消毒的抵抗力也與脊髓灰質(zhì)炎病毒相近。因此,國(guó)內(nèi)外研究人員認(rèn)為,大腸桿菌f2噬菌體是一種比較理想的水中腸道病毒污染的指示物,并將它廣泛用于飲用水消毒效果評(píng)價(jià),污水與環(huán)境水體中腸道病毒濃度、存活狀況評(píng)估,環(huán)境監(jiān)測(cè)方法與技術(shù)研究等方面。傳統(tǒng)的f2噬菌體檢測(cè)方法有濁度比色、空斑實(shí)驗(yàn)等,后者既可定性也可定量,是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法。但是,它需要培養(yǎng)宿主菌和嚴(yán)格的無菌操作等繁瑣過程。尋找更加簡(jiǎn)單、快捷、經(jīng)濟(jì)、可靠的f2噬菌體檢測(cè)方法,是研究者不懈努力的方向。大量研究資料表明,能夠滿足上述檢測(cè)要求的可行方法,有免疫層析、ELISA等免疫學(xué)方法。但是到目前為止,針對(duì)f2噬菌體相關(guān)報(bào)道幾乎未見。因此,本研究嘗試制備兔抗f2噬菌體多克隆抗體,以摸索出一條制備其抗體的方法和途徑,為相關(guān)的單克隆抗體制備及f2噬菌體的檢測(cè)研究提供最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)素材。f2噬菌體為不含包膜的病毒顆粒,核衣殼表面含有豐富的抗原決定簇,用它免疫動(dòng)物,不同的抗原決定簇能刺激不同的淋巴細(xì)胞而產(chǎn)生針對(duì)不同決定簇的抗...

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2間接ELISA法方陣滴定結(jié)果

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華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文表4間接ELISA法方陣滴定結(jié)果Table4Detectionresultofcheckerboardtitration二抗稀釋倍數(shù)濃度包被空白陰性對(duì)照1:5001:10001:20001:40001:....


圖6光學(xué)顯微鏡下免疫磁珠Fig.6Magneticbeads(A)andimmunomagneticbeads(B)undermicroscope

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華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果3.1免疫磁珠的制備光學(xué)顯微鏡下,微(空白)磁珠顆粒分布均勻,很少見到成團(tuán)現(xiàn)象,在磁場(chǎng)中有著良好的超順磁性,并能迅速凝集成團(tuán)(圖6A),而直接觀察本實(shí)驗(yàn)制備的免疫磁珠可見溶液混濁度增加,光學(xué)顯微鏡下顆粒分布均勻,磁珠體積變大....


圖1多競(jìng)隆抗體的形成

圖1多競(jìng)隆抗體的形成

針對(duì)某一種抗原決定族的抗體,在連續(xù)免疫時(shí),一種抗原的多種決定族會(huì)刺激多個(gè)免疫細(xì)胞增殖分化,這樣就可能分泌多種抗體,像這種有同一抗原不同抗原決定族引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生的不同類型的單一抗體,稱為多克隆抗體(見圖1)。效價(jià)不同的多克隆抗體直接影響到各種應(yīng)用的效果,要把抗體應(yīng)用到人體及臨床,必須....



本文編號(hào):4025342

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