發(fā)布時間：2024-07-05 18:20

　　[背景與目的]腸易激綜合征(irritable bowel syndrome,IBS)是常見的功能性腸病,其發(fā)病機制尚不清楚。已提出的有胃腸動力異常,內(nèi)臟敏感性改變,腦-腸相互作用、神經(jīng)免疫內(nèi)分泌失調(diào)等機制,但什么細胞及分子參與IBS的機制尚不清楚。細胞或器官功能的異常必然有其物質(zhì)的基礎,蛋白質(zhì)是生命活動的基礎,本研究應用蛋白質(zhì)組學方法,尋找腹瀉型IBS(IBS withdiarrhea,IBS-D)患者和正常人結(jié)腸黏膜的差異表達蛋白質(zhì),旨在篩選出對IBS-D發(fā)病起重要作用的蛋白質(zhì),揭示IBS-D的分子機制。 [材料與方法]IBS-D患者5例,診斷均符合功能性胃腸病羅馬Ⅲ科研診斷標準,健康志愿者5例為對照組。分別在進行結(jié)腸鏡檢查時,直視下于盲腸及乙狀結(jié)腸粘膜各活檢4塊;3塊立即置于含0.1%苯甲基磺酰氟的冰鹽水中洗凈,液氮中保存;1塊于福爾馬林溶液中固定,石蠟包埋。將兩部位液氮標本等量混合,提取組織總蛋白后,進行雙向凝膠電泳。采用銀染法對凝膠進行顯色固定,掃描儀獲取圖像。使用Image Master 2D Elite軟件對圖像進行分析,篩選出在IBS-D組表達有明顯差異的蛋白質(zhì)點;選取...

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1蛋白質(zhì)點的手工編輯

ImageMasterZD原則上在檢測前不對圖像作任何處理，在點檢測完成后消減背景。(3)匹配匹配是2一DE圖像分析中的重要一步。匹配時首先要創(chuàng)建參考凝膠，參考凝膠一般選擇一組凝膠中的蛋白點數(shù)較多的一張，可以通過改變向量框和搜索框的大小來操縱匹配。由于電泳過程中的一些影響因素的作....

圖19(a)IBs一n組10號點(b)正常對照組10號點

圖19(a)IBs一n組10號點(b)正常對照組10號點1.2實驗儀器及試劑1.2.1儀器:質(zhì)譜分析儀:電噴霧一四級桿一飛行時間質(zhì)譜儀(electricsPrayingioquadruploe一timeofflighi一masssPeetromet仃，ESI一Q一TOF一MS)、....

圖20檢索參數(shù):1號點Q一TOF圖

圖20檢索參數(shù):TyPeofsearehEnzymeFixedmodifieationsVariablemodificationsMassvaluesProteinMassPePtideMassToleraneeFragmentMassToleraneeMax....

圖21檢索參數(shù):2號點Q一TOF圖

‘.︹寸0t.，幻盯L5025.C11x‘甘諸不.明和O10001咖M+日20的2陰02780圖21檢索參數(shù):TyPeofsearehEnzymeFixedmodifieationsVariablemodifieationsMassvaluesProteinMas....

本文編號：4001338