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HBV RNase H結構域區(qū)氨基酸變異對HBV復制影響的初步研究

發(fā)布時間:2025-05-26 23:25
  第一部分HBV RNase H活性位點氨基酸變異對HBV復制的影響 摘要目的:探討HBV RNase H結構域區(qū)活性位點關鍵氨基酸及其變異對病毒復制的影響。方法:采用計算機軟件對HBV (adw2), DHBV、Heron HBV(蒼鷺HBV)和WHV(土撥鼠HBV)四種病毒的RNase H區(qū)域的氨基酸序列進行比較,并參考HIV、大腸桿菌RNase H活性位點D-E-D-D motif結構,采用Mega-PCR (Mega-primer PCR,大引物法PCR)將HBV (adw2) RNase H序列第D702、H728、E731和D790位氨基酸定向突變,構建了D702A、H728V、E731A和D790A 4個RNase H突變體的表達質粒。將構建的RNase H突變體、陽性對照D750V(RNase H功能缺陷)、陰性對照pCMV-HBV-LE-(RNase H功能正常)表達質粒分別轉染Huh7細胞,轉染后第5天從細胞胞漿中回收病毒顆粒、提取病毒核酸。為明確病毒顆粒中核酸組分,各樣本取2等份,其中一份加RNase H(來自于大腸桿菌),另一份不加RNase H,進行體外消...

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學位級別】:博士

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前言
第一部分 HBV RNase H 活性位點氨基酸變異對病毒復制的影響
    引言
    材料和方法
    結果
    討論
    參考文獻
第二部分 HBV RNase H 引物套區(qū)氨基酸變異對病毒復制的影響
    引言
    材料和方法
    結果
    討論
    參考文獻
第三部分 HCV 準種差異性與早期病毒學應答關系的研究
    中文摘要
    英文摘要
    引言
    材料和方法
    結果
    討論
    參考文獻
綜述
    參考文獻
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本文編號:4047141

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