微小RNA-195調控轉化生長因子-β/Smad信號通路影響肝纖維化機制研究
發(fā)布時間:2025-05-28 05:48
目的研究微小RNA-195(miR-195)調節(jié)轉化生長因子-β1(TGF-β1)誘導的大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)活化與Smad7表達的關系。方法體外培養(yǎng)HSC-T6,用5 ng·mL-1TGF-β1作為刺激因子,模擬大鼠肝纖維化模型。將細胞分為6組:對照組、模型組(TGF-β1組)、miR-195 mimic實驗組、miR-195 mimic NC實驗組、miR-195 inhibitor實驗組及miR-195 inhibitor NC實驗組。分別用5 ng·mL-1TGF-β1處理HSC-T6細胞24,48,72 h后,以實時熒光定量PCR法檢測miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表達,以免疫印跡法檢測Smad7蛋白表達。結果在TGF-β1誘導下,miR-195的表達隨時間逐漸升高、α-SMA表達逐步上調而Smad7表達呈降低趨勢,差異均有統計學意義(P<0.01,P<0.01;P<0.05)。與模型組比較,miR-195 mimic能促進TGF-β1誘導的HSC-T6活化,升高miR-195、α-SMA...
【文章頁數】:4 頁
【文章目錄】:
材料與方法
1 材料
2 實驗方法
2.1 細胞培養(yǎng)[3]
2.2 細胞分組與處置
2.3 細胞瞬時轉染[5]
2.4 用實時熒光定量PCR (Real-time PCR) 法測定mRNA[5]
2.5 以免疫印跡法測定蛋白表達水平[5]
3 統計分析
結果
1TGF-β1對HSC-T6中miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表達的影響
2瞬時轉染miR-195 mimic及inhibitor對TGF-β1誘導的miR-195、Smad7及α-SMAmRNA表達變化的影響
3 轉染miR-195 mimic及inhibitor對TGF-β1誘導的Smad7蛋白表達變化的影響
討論
本文編號:4048169
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材料與方法
1 材料
2 實驗方法
2.1 細胞培養(yǎng)[3]
2.2 細胞分組與處置
2.3 細胞瞬時轉染[5]
2.4 用實時熒光定量PCR (Real-time PCR) 法測定mRNA[5]
2.5 以免疫印跡法測定蛋白表達水平[5]
3 統計分析
結果
1TGF-β1對HSC-T6中miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表達的影響
2瞬時轉染miR-195 mimic及inhibitor對TGF-β1誘導的miR-195、Smad7及α-SMAmRNA表達變化的影響
3 轉染miR-195 mimic及inhibitor對TGF-β1誘導的Smad7蛋白表達變化的影響
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