發(fā)布時間：2018-07-11 14:38

  本文選題：HepG細胞 + 胰島素抵抗　； 參考：《核農(nóng)學(xué)報》2017年09期

【摘要】：為建立方便、可靠、重復(fù)性好的胰島素抵抗細胞模型,研究胰島素受體底物-2(IRS-2)蛋白磷酸化與胰島素抵抗的關(guān)系以及不同鉻制劑對細胞葡萄糖代謝的作用。試驗采用高胰島素、高糖聯(lián)合誘導(dǎo)Hep G2細胞建立胰島素抵抗模型,通過葡萄糖氧化酶法及噻唑藍比色法(MTT)分析受試物對細胞葡萄糖代謝及活性的影響,優(yōu)化最佳造模條件;同時,利用蛋白免疫印跡法(WB)分析IRS-2的蛋白表達及其蛋白磷酸化,驗證模型的胰島素抵抗性。在此基礎(chǔ)上,將模型應(yīng)用于分析葡萄糖耐量因子(GTF)及其它鉻制劑的降糖效果。結(jié)果表明,高胰島素(10-6mol·L~(-1))和高糖培養(yǎng)基(25 mmol·L~(-1))處理細胞48h,細胞存活率達96%,與對照組相比,葡萄糖消耗量降低了5.7%,IRS-2含量減少31.02%,胰島素抵抗效果顯著,且該胰島素抵抗模型可穩(wěn)定維持48 h。相比于吡啶酸鉻和三氯化鉻,GTF對細胞葡萄糖代謝有顯著的改善作用,其最佳作用濃度為1.0μg·m L-1。利用HepG2細胞建立體外胰島素抵抗模型,方法簡單可靠、重復(fù)性好,可廣泛應(yīng)用于天然活性物質(zhì)的降糖功能研究。
[Abstract]:In order to establish a convenient, reliable and reproducible insulin resistance cell model, the relationship between insulin receptor substrate 2 (IRS-2) protein phosphorylation and insulin resistance and the effect of different chromium preparations on glucose metabolism were studied. The insulin resistance model of Hep G2 cells induced by high insulin and high glucose was established. The effects of glucose oxidase and thiazolyl blue colorimetric assay (MTT) on glucose metabolism and activity of Hep G2 cells were analyzed to optimize the optimal model conditions. At the same time, the protein expression and protein phosphorylation of IRS-2 were analyzed by Western blotting (WB) to verify the insulin resistance of the model. On this basis, the model was applied to analyze the hypoglycemic effect of glucose tolerance factor (GTF) and other chromium preparations. The results showed that the survival rate of cells treated with high insulin (10-6mol L-1) and high glucose medium (25 mmol L ~ (-1) for 48 h was 96. Compared with the control group, glucose consumption decreased the content of IRS-2 decreased by 31.02, and the effect of insulin resistance was significant. The insulin resistance model was stable for 48 h. Compared with Chromium picolinate and Chromium trichloride GTF, the glucose metabolism of the cells was significantly improved, and the optimum concentration was 1.0 渭 g ml ~ (-1). The model of insulin resistance in vitro was established by HepG2 cells. The method is simple, reliable and reproducible, and can be widely used in the study of the hypoglycemic function of natural active substances.
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所;天津科技大學(xué)食品工程與生物技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國家自然基金面上項目(31371763) 中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費專項(S2016JC01)
【分類號】：R91

【參考文獻】

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10 董t盆，

本文編號：2115527