發(fā)布時間：2024-07-02 20:42

　　目的:確證血液特異性mRNA分子存在人群多態(tài)性,并可利用這種多態(tài)性進行混合斑個體識別。方法:本課題利用復合擴增技術(shù)(multiplex PCR)和單堿基延伸技術(shù)(SNaPshot)對血液特異性mRNA分子上的SNP位點進行檢測。構(gòu)建針對5個血液特異性基因的16個SNP位點的檢測試劑盒方法如下:(1)通過文獻尋找血液特異性mRNA分子,同時利用NCBI的dbSNP數(shù)據(jù)庫尋找這些基因上的SNP位點。(2)對篩選出的SNP位點利用Primer3軟件設計引物。(3)對每對設計好的引物進行引物特異性和體液特異性檢測。(4)將所有引物進行復合擴增,并調(diào)整復合擴增體系。(5)利用SNaPshot技術(shù)檢測16個血液特異性SNP位點,得出分型結(jié)果。(6)對構(gòu)建好的體系進行應用性驗證并計算法醫(yī)學參數(shù),包括人群多態(tài)性,和對混合斑檢測能力的驗證。結(jié)果:1、成功構(gòu)建了基于毛細管電泳平臺(CE)利用SNaPshot技術(shù)檢測16個血液特異性SNP位點的檢測試劑盒。2、對山西人群進行多態(tài)性統(tǒng)計,這一體系的個體識別能力達到0.99929。3、利用該檢測體系對混合斑進行分析,在進行血液供者占比為1%的極度不平衡混合斑檢測...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖116個血液特異性mRNA分型檢測結(jié)果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文12圖116個血液特異性mRNA分型檢測結(jié)果圖中藍色峰代表鳥嘌呤（G）；綠色代表腺嘌呤（A）；黑色代表胞嘧啶（C）；紅色代表胸腺嘧啶（T）。圖片展示的是5ng血液模板所獲得的分型結(jié)果。3討論許多混合斑樣本由多人多種體液構(gòu)成，且這種檢材往往伴隨著極度不平衡混....

圖1陰道分泌液，唾液，精液，皮膚特異性檢測結(jié)果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文222.5混合斑檢測結(jié)果很多在案發(fā)現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)的檢材是混合斑檢材，我們這一課題的目的也在于解決多人構(gòu)成的混合斑和極度不平衡混合斑問題。因此我們制作了兩種體液構(gòu)成的極度不平衡混合斑樣本和多人多種體液構(gòu)成的極度不平衡混合斑樣本。對于前者，我們將血液RNA分別與唾液....

圖2月經(jīng)血特異性檢測結(jié)果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文23圖2月經(jīng)血特異性檢測結(jié)果利用本體系對5ng月經(jīng)血模板進行檢測電泳結(jié)果圖。可檢測到大部分靜脈血特異性SNP位點，但大部分峰的峰高低于500RFU。圖3靈敏度檢測結(jié)果上圖表示1ngRNA模板經(jīng)電泳檢測分型結(jié)果圖，下圖表示0.1ngRNA模板經(jīng)電泳檢測結(jié)果圖....

圖3靈敏度檢測結(jié)果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文23圖2月經(jīng)血特異性檢測結(jié)果利用本體系對5ng月經(jīng)血模板進行檢測電泳結(jié)果圖。可檢測到大部分靜脈血特異性SNP位點，但大部分峰的峰高低于500RFU。圖3靈敏度檢測結(jié)果上圖表示1ngRNA模板經(jīng)電泳檢測分型結(jié)果圖，下圖表示0.1ngRNA模板經(jīng)電泳檢測結(jié)果圖....

本文編號：3999983