發(fā)布時間：2025-05-28 02:17

　　 目的觀察線粒體鈣單向轉(zhuǎn)運體(mitochondrial Ca²⁺ uniporter,MCU)在模擬失重引起大鼠腦動脈平滑肌細胞凋亡中的作用。方法采用尾吊大鼠方法建立模擬失重模型,實驗大鼠分為對照（Control,CON）組和尾吊（tail suspension,SUS）組。造模成功后,分離腦動脈血管,取病理切片行TUNEL染色及細胞色素C免疫熒光染色檢測平滑肌細胞凋亡水平,蛋白免疫印跡實驗檢測凋亡相關蛋白及MCU蛋白表達水平,最后急性分離腦動脈平滑肌細胞,分別采用Rhod-2 AM、mitoSOX染色檢測細胞線粒體內(nèi)Ca²⁺水平和活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平。結果與對照組比較,尾吊組模擬失重大鼠基底動脈平滑肌細胞TUNEL陽性率顯著增加（P<0.05）,細胞色素C入核率顯著增加（P<0.05）,促凋亡蛋白cleaved caspas-9、cleaved caspas-3、Bax表達顯著增加（P<0.05）,抑制凋亡蛋白Bcl-2顯著降低（P<0.05）;同時,MCU蛋白表達水...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 模擬失重大鼠模型的建立
        1.2.2 TUNEL染色法檢測細胞凋亡
        1.2.3 Western blot法檢測蛋白表達
        1.2.4 急性分離大鼠腦動脈平滑肌細胞
        1.2.5 免疫熒光檢測腦動脈平滑肌細胞MCU與細胞色素C
        1.2.6 腦動脈平滑肌細胞線粒體ROS與Ca2+濃度檢測
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 實驗動物建模
    2.2 模擬失重對大鼠腦動脈血管平滑肌細胞凋亡的影響
    2.3 模擬失重大鼠腦動脈血管平滑肌細胞MCU表達的檢測
    2.4 模擬失重大鼠腦動脈平滑肌細胞線粒體Ca2+濃度的檢測
    2.5 模擬失重大鼠腦動脈平滑肌細胞ROS水平的檢測
3 討論



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