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補陽還五湯對SCII模型大鼠細胞自噬相關蛋白影響的研究

發(fā)布時間:2020-11-22 09:31
   目的:探討補陽還五湯對大鼠脊髓缺血再灌注損傷(SCII)后細胞自噬相關蛋白Beclin 1、微管相關蛋白1輕鏈3(LC3)、P62(死骨片1)影響的機制研究。方法:48只SD大鼠隨機分為假手術組、模型組、觀察組和3-MA組,模型組腹腔內注射生理鹽水,觀察組在造模的前三天給予補陽還五湯湯藥灌胃,3-MA(3-甲基腺嘌呤)組腹腔注射3-MA注射液,然后夾閉腹主動脈40min開放,造模后,在缺血3h、6h后進行行為學評分、取材,進行免疫組化檢測Beclin 1、LC3、P62的表達變化、透視電鏡檢測。結果:在缺血3h后、6h后,假手術組與其他三組在Beclin1、LC3和P62等方面比較有統計學意義(P0.05),模型組、觀察組和3-MA組三種蛋白的表達均上調。行為學評分、透視電鏡檢測與免疫組化結果基本一致,可以相互印證。結論:補陽還五湯可能會對細胞自噬進行雙向調節(jié),保護神經細胞。
【部分圖文】:

形態(tài)分布,倍率,髓鞘


假手術組大鼠脊髓組織神經元組織結構基本正常,核型規(guī)則為圓形或橢圓形,核膜完整,核內染色質均勻,核仁明顯。胞質中細胞器形態(tài)分布及數目正常,髓鞘圍繞軸索呈同心圓排列,軸索內有微絲和微管,排列規(guī)則,未見軸漿變性及顆粒狀崩解(詳見圖a,b)。模型組3 h后、6 h后可見脊髓組織神經元胞漿廣泛水腫,線粒體腫脹、空泡化,粗面內質網松散,游離核糖體增多,溶酶體形態(tài)不規(guī)則,細胞中有大量由單層膜組成的自噬囊泡,其中有高電子密度的吞噬顆粒(即自噬小體)(詳見圖1c,d)。觀察組3 h后髓鞘水腫明顯,髓鞘板層圍繞軸索呈同心圓排列,軸索內有微絲和微管,排列較紊亂,但未見軸漿變性及顆粒狀崩解,線粒體腫脹、空泡化,可見部分自噬小體。觀察組6 h后髓鞘水腫明顯減退,神經元組織結構基本正常,核型規(guī)則為圓形或橢圓形,核膜完整,核內染色質均勻,核仁明顯,髓鞘板層圍繞軸索呈同心圓排列,軸索內有微絲和微管,排列規(guī)則,自噬小體減少(詳見圖1e,f)。3-MA組3h后、6 h后髓鞘板層圍繞軸索呈同心圓排列,軸索內有微絲和微管,排列較紊亂,線粒體腫脹、空泡化,但未見軸漿變性及顆粒狀崩解,未見明顯自噬小體(詳見圖1g,h)。3 討論
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