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長(zhǎng)鏈非編碼RNA FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌中的作用及分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2024-12-21 06:43
  目的探討長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,antisense lnc RNA)FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)組織中的表達(dá)及其潛在的臨床價(jià)值;探討FBXL19-AS1對(duì)CRC細(xì)胞生物學(xué)功能的影響;探討FBXL19-AS1與其正義鏈FBXL19相互作用的關(guān)系及其在Wnt信號(hào)通路中的作用機(jī)制。方法使用熒光定量PCR(qRT-PCR)的方法檢測(cè)FBXL19-AS1在59例CRC患者癌組織及相應(yīng)癌旁組織的表達(dá)量,分析FBXL19-AS1在CRC組織中的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性;qRT-PCR及FISH法檢測(cè)FBXL19-AS1在細(xì)胞中的定位;檢測(cè)CRC細(xì)胞株中FBXL19-AS1的表達(dá)水平;構(gòu)建FBXL19-AS1短發(fā)夾RNA干擾載體,以及過表達(dá)載體轉(zhuǎn)染入CRC細(xì)胞株,檢測(cè)干擾及其過表達(dá)效率;通過CCK-8及平板克隆方法檢測(cè)CRC細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)FBXL19-AS1對(duì)CRC細(xì)胞周期及凋亡的影響;Transwell小室檢測(cè)FBXL19-AS1對(duì)CRC細(xì)胞遷移與侵襲能力;對(duì)FBXL19-AS1在CRC細(xì)胞中的生物學(xué)功能進(jìn)...

【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1RIP技術(shù)路線圖

圖2-1RIP技術(shù)路線圖

圖2-1RIP技術(shù)路線圖2.2.16細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)(1)將細(xì)胞爬片置于24孔板底,培養(yǎng)適量細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)前使細(xì)胞融合度達(dá)60%-70%,注意爬片與底板間不能產(chǎn)生細(xì)胞;(2)用1×PBS清洗細(xì)胞2次,每次5min;(3)用4%的固定液固定爬片20min,1×....


圖3-1Real-timePCR檢測(cè)FBXL19-AS1在CRC癌組織及癌旁組織中的表達(dá)(p<0.05)

圖3-1Real-timePCR檢測(cè)FBXL19-AS1在CRC癌組織及癌旁組織中的表達(dá)(p<0.05)

通大學(xué)碩士學(xué)位論文第三章結(jié)第三章結(jié)果.1結(jié)直腸癌組織中FBXL19-AS1的相對(duì)表達(dá)量檢測(cè)收集59對(duì)新鮮的CRC癌組織及相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本,用Trizol法提取相組織及癌旁組織的RNA,采用qRT-PCR方法檢測(cè)FBXL19-AS1的相對(duì)表達(dá)....


圖3-2FBXL19-AS1在細(xì)胞株中的定位

圖3-2FBXL19-AS1在細(xì)胞株中的定位

圖注:A:qRT-PCR檢測(cè),B:FISH檢測(cè)圖3-2FBXL19-AS1在細(xì)胞株中的定位3.4FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中的生物功能學(xué)研究3.4.1CRC細(xì)胞株中FBXL19-AS1的相對(duì)表達(dá)量培養(yǎng)正常人腸黏膜上皮細(xì)胞NCM460及四種人腸癌細(xì)胞....


圖3-3:FBXL19-AS1在CRC細(xì)胞株中相對(duì)表達(dá)量檢測(cè)

圖3-3:FBXL19-AS1在CRC細(xì)胞株中相對(duì)表達(dá)量檢測(cè)

圖注:A:qRT-PCR檢測(cè),B:FISH檢測(cè)圖3-2FBXL19-AS1在細(xì)胞株中的定位9-AS1在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中的生物功能學(xué)研胞株中FBXL19-AS1的相對(duì)表達(dá)量腸黏膜上皮細(xì)胞NCM460及四種人腸癌細(xì)胞系1,提取這5種細(xì)胞株的RNA,通過qRT-....



本文編號(hào):4018571

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