本文關(guān)鍵詞：帶npt-Ⅱ基因轉(zhuǎn)基因水稻快速檢測技術(shù)的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

帶npt-Ⅱ基因轉(zhuǎn)基因水稻快速檢測技術(shù)的建立 Quick testing-technology of transgenic rice with npt-Ⅱ screen marker gene

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摘要：

以轉(zhuǎn)溶菌酶基因水稻純系材料中花9號(ZH9(R))及其受體品種中花9號(ZH9(CK))為材料,以ZH9(R)中攜帶的npt-Ⅱ基因作為輔助篩選標(biāo)記,利用抗生素對其進(jìn)行處理,建立了一套快速檢測帶npt-Ⅱ基因轉(zhuǎn)基因水稻的技術(shù)體系.使用不同濃度的卡那霉素(Kanamycin,Kan)和G418溶液將ZH9(R)和ZH9(CK)成株離體葉片于室內(nèi)室溫下置于培養(yǎng)皿中浸泡處理,通過觀察葉片變化,確定G418為檢測帶npt-Ⅱ基因轉(zhuǎn)基因水稻的最佳抗生素,將G418(溶液)80mg/L濃度(處理4天)作為檢測該類轉(zhuǎn)基因水稻成株離體葉片的臨界濃度.進(jìn)一步用G418對ZH9(R)和ZH9(CK)種子、幼胚和幼苗進(jìn)行了不同處理.確定:(1)G418(溶液)300 mg/L濃度(處理7天)作為檢測該類轉(zhuǎn)基因水稻種子的臨界濃度;(2)G418(1/2MS+0.5 mg/L6-BA+1.5%蔗糖培養(yǎng)基)200 mg/L濃度(處理10天)作為檢測該類轉(zhuǎn)基因水稻幼胚的臨界濃度;(3)G418(1/2 MS+0.5 mg/L6-BA+1.5%蔗糖培養(yǎng)基)150 mg/L濃度(處理12天)作為檢測該類轉(zhuǎn)基因水稻幼苗的臨界濃度,并且通過PCR方法證實(shí)了上述結(jié)論.將這些結(jié)論應(yīng)用于ZH9(R)轉(zhuǎn)育后代葉片、種子、幼胚和幼苗群體的檢測,檢測效果都非常明顯.這為帶npt-Ⅱ基因轉(zhuǎn)基因水稻建立了一套簡便、直觀且準(zhǔn)確的檢測方法.

  本文關(guān)鍵詞：帶npt-Ⅱ基因轉(zhuǎn)基因水稻快速檢測技術(shù)的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。