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紅鰭笛鯛和金焰笛鯛視蛋白的體外表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2025-02-06 18:36
  紅鰭笛鯛(Lutjanus erythropterus)和金焰笛鯛(Lutjanus fulviflamma)隸屬于笛鯛科(Lutjanidae)、笛鯛屬(Lutjanus Bloch),屬于近海暖水性魚(yú)類(lèi),紅鰭笛鯛生活于為近底層而金焰笛鯛生活于淺水層,這兩種魚(yú)類(lèi)都是經(jīng)濟(jì)價(jià)值比較的高捕撈品種。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)笛鯛屬魚(yú)類(lèi)的研究集中在在養(yǎng)殖技術(shù)、病理研究、環(huán)境脅迫、系統(tǒng)發(fā)育等方面,在視蛋白基因方面的研究甚少。本論文以紅鰭笛鯛和金焰笛鯛為研究對(duì)象,對(duì)長(zhǎng)波長(zhǎng)敏感性視蛋白(LWS)和視桿蛋白(RH)進(jìn)行原核載體構(gòu)建和真核表達(dá),主要結(jié)果如下:1、用特異性引物L(fēng)WSF/R擴(kuò)增出紅鰭笛鯛目的基因LWS全長(zhǎng),并克隆到pMD-18T中,測(cè)序正確后,定向連接到原核表達(dá)載體pET-32a中,成功構(gòu)建紅鰭笛鯛LWS基因的原核表達(dá)載體并命名為pET-32a-LWS。2、用特異性引物ZLWSF/R擴(kuò)增出兩種笛鯛的LWS基因的開(kāi)放閱讀框,克隆到pMD-18T中,測(cè)序驗(yàn)證后,定向連接到真核表達(dá)載體pPICZαA中,成功構(gòu)建紅鰭笛鯛LWS基因和金焰笛鯛LWS基因的真核表達(dá)載體并分別命名為pPICZα-LWS-Ler和pPIC...

【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-2紅鰭笛鯛視網(wǎng)膜總RNA的電泳圖

圖2-2紅鰭笛鯛視網(wǎng)膜總RNA的電泳圖

廣東海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化組質(zhì)粒的鑒定質(zhì)粒采用菌液PCR,雙酶切和測(cè)序三種方法鑒定。菌液PCR所用引引物序列為T(mén)7:TAATACGACTCATAGGG;T7ter:TGCTAGTTAPCR反應(yīng)體系與2.2.3相同,將陽(yáng)性克隆菌株,提取質(zhì)粒,雙酶切檢進(jìn)行測(cè)序。與分析笛鯛總....


圖2-2紅鰭笛鯛視網(wǎng)膜總RNA的電泳圖

圖2-2紅鰭笛鯛視網(wǎng)膜總RNA的電泳圖

廣東海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化組質(zhì)粒的鑒定質(zhì)粒采用菌液PCR,雙酶切和測(cè)序三種方法鑒定。菌液PCR所用引引物序列為T(mén)7:TAATACGACTCATAGGG;T7ter:TGCTAGTTAPCR反應(yīng)體系與2.2.3相同,將陽(yáng)性克隆菌株,提取質(zhì)粒,雙酶切檢進(jìn)行測(cè)序。與分析笛鯛總....



本文編號(hào):4030734

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