發(fā)布時間：2024-07-02 02:04

　　目的:豬鏈球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一種重要的人豬共患病原菌,可導致非可逆性腦膜炎、休克,甚至猝死。中性粒細胞,也被稱為多形核白細胞(Polymorphonuclear,PMN),作為防御細菌性感染的第一道防線,在細菌性腦膜炎中發(fā)揮重要作用。核糖體蛋白SA(Ribosomal protein SA,RPSA)作為細胞表面受體,在病原體粘附到宿主細胞的過程中發(fā)揮重要作用。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)SS2誘發(fā)腦膜炎時,小鼠腦組織內(nèi)中性粒細胞浸潤增多及中性粒細胞表面RPSA表達增加。因此,本研究旨在探究RPSA陽性中性粒細胞在SS2誘發(fā)腦膜炎過程中的功能及對血腦屏障(Blood Brain Barrier,BBB)的影響。方法:本研究首先選用C57BL/6小鼠進行SS2感染試驗,通過流式細胞術分析小鼠腦組織中性粒細胞、RPSA陽性中性粒細胞的的表達量,平板菌落計數(shù)法計數(shù)腦組織載菌量;體外分離小鼠骨髓中性粒細胞,通過流式細胞術、激光共聚焦顯微鏡、qPCR進行體外RPSA陽性中性粒細胞的驗證;通過流式細胞術、免疫熒光顯微鏡、qPCR分析PMN RPSA

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖4.1（A）、（B）流式細胞術檢測小鼠腦組織PMN及PMNRPSA+表達量

第4章實驗結(jié)果18圖4.1（A）、（B）流式細胞術檢測小鼠腦組織PMN及PMNRPSA+表達量。（C）腦組織載菌量的檢測。Fig.4.1(A)and(B)FlowcytometrywereusedtodetecttheexpressionofPMNandPMNRPSA+inmou....

圖4.2（A）流式細胞術鑒定小鼠骨髓中性粒細胞的純度

第4章實驗結(jié)果19圖4.2（A）流式細胞術鑒定小鼠骨髓中性粒細胞的純度。（B）20×低倍熒光顯微鏡觀察小鼠骨髓中性粒細胞的細胞核形態(tài)。（C）吉姆薩染色觀察小鼠骨髓中性粒細胞的細胞核形態(tài)。Fig.4.2(A)Thepurityofmousebonemarrowneutrophils....

圖4.3（A）流式細胞術檢測SS2誘導后小鼠骨髓中性粒細胞RPSA的表達量

第4章實驗結(jié)果20圖4.3（A）流式細胞術檢測SS2誘導后小鼠骨髓中性粒細胞RPSA的表達量。（B）60×高倍鏡激光共聚焦顯微鏡觀察小鼠骨髓中性粒細胞胞膜和胞核RPSA的定位。（C）qPCR檢測小鼠骨髓中性粒細胞RPSA的表達量。Fig.4.3(A)RPSAexpressiono....

圖4.4（A）、（B）流式細胞術檢測PMNRPSA+及PMNRPSA-的吞噬功能

第4章實驗結(jié)果21體內(nèi)動物實驗和體外實驗發(fā)現(xiàn)SS2可誘導中性粒細胞表達RPSA，體內(nèi)實驗已發(fā)現(xiàn)腦組織PMN、PMNRPSA+與載菌量呈負相關。因此，探究PMNRPSA+與PMNRPSA-功能如何？通過流式細胞術分析PMNRPSA+與PMNRPSA-吞噬功能，結(jié)果表明：各組PMNR....

本文編號：3999525