發(fā)布時(shí)間：2020-12-10 09:38

　　選題依據(jù):黃芪是山西大宗道地藥材之一。多糖作為黃芪中的主要免疫活性成分,卻因結(jié)構(gòu)可控性難題,未能作為質(zhì)控指標(biāo)。近年來隨著膜材料、色譜填料技術(shù)等發(fā)展,超濾法、新一代凝膠色譜法的應(yīng)用,使得多糖組分可以根據(jù)分子量進(jìn)行系統(tǒng)表征和分離。新技術(shù)、新表征方法的應(yīng)用不僅可避免了多糖結(jié)構(gòu)測定的技術(shù)瓶頸,而且從整體上可以精準(zhǔn)表征中藥材多糖的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。基于TSK凝膠色譜法進(jìn)行黃芪多糖分子量分布的糖譜表征可鑒別出不同種屬、不同基原、不同生長方式下黃芪藥材的差異。通過超濾法可截留制備出不同分子量黃芪多糖,為系統(tǒng)免疫活性篩選奠定了基礎(chǔ)。因此本研究通過TSK凝膠色譜分離法和超濾截留法,進(jìn)行不同分子量黃芪多糖糖譜表征和制備,分別進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究（單糖組成、連接位點(diǎn)分析）,同時(shí)進(jìn)行非特異性和特異性免疫活性篩選（體外細(xì)胞活性評價(jià)和體內(nèi)動(dòng)物活性驗(yàn)證）,找出黃芪多糖中活性最強(qiáng)組分,建立黃芪多糖特征糖譜結(jié)合細(xì)胞免疫活性評價(jià)方法進(jìn)行不同來源黃芪質(zhì)量比較。研究不僅為闡明黃芪多糖藥理功能物質(zhì)奠定了基礎(chǔ),而且促進(jìn)了藥物研發(fā)。目的:將黃芪多糖（APS）按分子量分布情況分離不同組分,解析各組分結(jié)構(gòu)并篩選出免疫活性最強(qiáng)的組分。并通過建立黃芪多糖... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

基于多糖分子量分布和不同免疫活性比較的黃芪質(zhì)量研究20圖3.1不同濃度葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線2）蛋白質(zhì)含量的測定在595nm處測定的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3.2所示。得到蛋白質(zhì)標(biāo)品的線性回歸方程為A=0.4397C+0.011（相關(guān)系數(shù)=0.9971）。計(jì)算得蛋白質(zhì)含量為0.42%。圖3.2不同濃度蛋白質(zhì)標(biāo)品標(biāo)準(zhǔn)曲線3）分子量的測定采用高效凝膠過濾色譜法（HPGFC）測得右旋糖酐對照品的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3.3所示。得到右旋糖酐對照品的線性回歸方程為logMw=﹣0.5336tR+14.898（相關(guān)系數(shù)=0.9901）。并計(jì)算提取的黃芪多糖分子量分布情況，其結(jié)果如圖3.4所示（圖3.4的色譜峰上的數(shù)據(jù)為各切割部分的最高點(diǎn)的相對分子量（Mp））。黃芪多糖樣品的HPGFC圖譜按圖3.4的峰起伏切割成4個(gè)部分（或稱級分）。第一部分和第二部分的MW大于2MDa（超出線性范圍），第三部分的分子量約為10kDa，第四部分的分子量約為300Da。

第三章黃芪多糖中不同分子量多糖組分的分離及結(jié)構(gòu)解析21圖3.3右旋糖酐標(biāo)準(zhǔn)對照品保留時(shí)間及其相應(yīng)分子量的對數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖3.4蒸發(fā)光散射檢測器高效液相色譜（HPLC-ELSD）測定總黃芪多糖（APS）色譜圖4）單糖組成的測定用PMP柱前衍生化-高效液相色譜法測定了8種標(biāo)準(zhǔn)單糖混合物色譜圖（圖3.5A）和樣品黃芪單糖特征圖譜（圖3.5B）。將單糖混合對照品圖譜與樣品黃芪單糖特征圖譜進(jìn)行對照，得出山西渾源黃芪多糖是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和半乳糖醛酸5種單糖組成的。以阿拉伯糖的物質(zhì)的量為1，求得鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的物質(zhì)的量比為0.43:0.23:19.36:0.69:1。其中含有葡萄糖是最多的，其次是阿拉伯糖和半乳糖。>2000KDa10247Da286Da


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