發(fā)布時間：2018-01-16 01:05

  本文關鍵詞：Ad-HGF促進老年大鼠心梗后c-kit陽性心臟干細胞的增殖與分化及機制研究　出處：《南京醫(yī)科大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：背景缺血性心臟病因其嚴重的致死率與極差的預后引起了極大的重視。在我國,缺血性心臟病死亡率呈明顯上升趨勢,平均為62.5/100,000人,是45歲以上男性和65歲以上女性的主要死亡原因。據(jù)統(tǒng)計,2015年我國65歲及以上人口為14434萬人,近十年65歲及以上人口逐年增加,人口老齡化的高峰即將到來。這將導致老年群體中缺血性心臟病尤其是心肌梗死的發(fā)病人數(shù)進一步增加。傳統(tǒng)治療方法包括藥物治療、血管介入成形術和外科冠脈旁路移植術,這些方法雖然提高了心肌梗死的生存率和生活質(zhì)量,但對壞死心肌作用有限,尤其對彌漫性冠狀動脈病變難以奏效,心肌梗死已成為心力衰竭的首要原因。因此,探索老年人心梗后心肌再生修復的策略尤為重要。C-kit陽性心臟干細胞(C-kit+CSCs)的發(fā)現(xiàn)為我們修復損傷的心臟提供了治療方向。C-kit陽性心臟干細胞具有高度自我更新能力,能夠特異性分化為心臟結(jié)構(gòu)細胞(心肌細胞、平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞)。然而,在老年心肌梗死的心臟中c-kit+CSCs的增殖和分化的調(diào)控機制仍不清楚。我們前期研究發(fā)現(xiàn)肝細胞生長因子(HGF)對心梗后心臟具有保護作用,然而HGF對于老年心梗后c-kit+ CSCs的增殖與分化的影響尚不清楚。目的本研究旨在探討HGF對于老年大鼠心梗后心臟c-kit+ CSCs的增殖和分化的影響及潛在的分子機制。方法1.應用免疫熒光與Western blot技術分別檢測幼年(2-3天)、中年(6-10月齡)和老年(18-22月齡)大鼠心臟中c-kit+ CSCs的表達情況與心肌組織中HGF及其磷酸化受體p-Met的表達水平,進而評價c-kit+CSCs與HGF在不同年齡大鼠心臟中的表達水平是否具有相關性;2.采用冠狀動脈左前降支(LAD)結(jié)扎法構(gòu)建老年大鼠的心肌梗死模型,并將腺病毒攜帶的肝細胞生長因子(Ad-HGF)注射到大鼠心肌梗死的周邊區(qū),研究Ad-HGF對于c-kit+ CSCs增殖和分化的影響;3.采用Western blot與免疫熒光技術檢測Ad-HGF對老年大鼠心梗后心肌細胞壞死性凋亡的影響并進一步應用壞死性凋亡抑制劑Necrostatin-1(Nec-1)抑制壞死性凋亡,探討其對c-kit+ CSCs增殖與分化的影響;4.采用Western blot、免疫熒光與ELISA技術研究Ad-HGF對心肌組織及外周血清中高遷移率族蛋白B1(HMGB1)的水平與骨髓中c-kit+干細胞表達情況的影響;5.采用免疫熒光、Western blot、心臟超聲與馬松染色技術評價Ad-HGF對老年大鼠心梗后心肌重塑及心臟功能的影響。結(jié)果1.隨著大鼠年齡的增長,其心臟中c-kit+ CSCs與HGF蛋白的表達水平逐漸降低,并且二者之間呈現(xiàn)出顯著正相關;2.Ad-HGF促進了老年大鼠心肌梗死后心臟中c-kit+CSCs的增殖與分化,并進一步促進了梗死周邊區(qū)域心肌細胞的增殖與血管的再生;3.Ad-HGF誘導了老年大鼠心梗后心肌細胞壞死性凋亡的發(fā)生,提高了心肌組織與外周血中HMGB1蛋白的表達水平,并增加了骨髓中c-kit+干細胞的數(shù)量;4.抑制壞死性凋亡減弱了 Ad-HGF誘導的老年大鼠心梗后c-kit陽性心臟干細胞的增殖與分化,減少了梗死周邊區(qū)心肌和血管的再生,同時降低了心肌組織與外周血中HMGB1蛋白表達水平及梗死后大鼠骨髓中c-kit陽性干細胞的數(shù)量;5.Ad-HGF抑制了老年大鼠心梗后心肌細胞的凋亡,減輕了梗死區(qū)域心肌纖維化的水平,并改善了心梗后的心臟功能。結(jié)論Ad-HGF促進了老年大鼠心梗后心臟中c-kit+ CSCs的增殖與分化并進一步促進了心肌和血管的再生,改善了心梗后的心肌重塑與心臟功能。這可能與Ad-HGF誘導了梗死區(qū)域心肌壞死性凋亡的發(fā)生,進而增加了心肌組織與外周血中HMGB1的表達水平,并促進骨髓中c-kit+干細胞的增殖有關。
[Abstract]:Objective To investigate the effects of HGF on the proliferation and differentiation of c - kit + CSCs in aged rats .

【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R542.22

【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 ;HGF percutaneous endocardial injection induces cardiomyocyte proliferation and rescues cardiac function in pigs[J];Journal of Biomedical Research;2010年03期

2 張金生;王階;;三七總皂苷動員心肌梗死大鼠骨髓干細胞出髓效率的實驗研究[J];中國中藥雜志;2009年07期

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本文編號：1430842