發(fā)布時(shí)間：2025-01-20 17:36

　　結(jié)核病（TB）是由結(jié)核分枝桿菌（Mtb）感染引起的慢性傳染性疾病。近年來,由于人口流動(dòng)性增加,艾滋病蔓延以及Mtb耐藥菌株出現(xiàn)等,全球結(jié)核病疫情日益加重,全球每年新發(fā)結(jié)核病例1000萬人,死亡人數(shù)高達(dá)150萬,居致死性感染疾病之首。目前中國(guó)結(jié)核病死亡人數(shù)為3.7萬,處于結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家前列,因此,結(jié)核防治是我國(guó)仍需面臨的重大公共衛(wèi)生問題。巨噬細(xì)胞是Mtb進(jìn)入機(jī)體的第一道防線,然而諷刺的是,Mtb經(jīng)長(zhǎng)期進(jìn)化已形成多種調(diào)控機(jī)制抵御巨噬細(xì)胞的殺傷（如抑制吞噬、降低自噬、阻礙凋亡、抑制炎癥等）,使得巨噬細(xì)胞不僅喪失了清除Mtb的能力,甚至淪為Mtb躲避機(jī)體免疫應(yīng)答的避難所。近年來,諸多毒力因子被報(bào)道參與Mtb免疫逃逸,這些分子通過調(diào)控巨噬細(xì)胞的免疫功能,增加Mtb在宿主中的生存。然而,Mtb毒力因子的免疫逃逸機(jī)制尚不完全清楚。因而,深入探究毒力因子在巨噬細(xì)胞中的功能,既可為研究新型結(jié)核疫苗尋找潛在的抗原,又可為預(yù)防和治療結(jié)核病的藥物提供新的靶點(diǎn)。SapM是Mtb重要的分泌型毒力因子,是由H37Rv的3310位基因編碼的一種酸性磷酸酶,主要催化P13P。研究表明,Mtb感染吞噬細(xì)胞后,SapM能夠...

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 毒力因子SapM促進(jìn)Mtb在巨噬細(xì)胞中的生存
    前言
    材料與方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
        二. 實(shí)驗(yàn)方法
    結(jié)果
        一. Mtb毒力因子SapM蛋白表達(dá)純化及其多克隆抗體的制備
        二. SapM過表達(dá)恥垢分枝桿菌(Ms::SapM)的構(gòu)建及鑒定
        三. H37RvΔSapM的敲除菌株及H37RvΔSapM::SapM回補(bǔ)菌株的構(gòu)建及鑒定
        四. SapM巨噬細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株(RAW-SapM)的構(gòu)建及鑒定
        五. SapM促進(jìn)巨噬細(xì)胞中分枝桿菌的存活
        六. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn):SapM顯著增加感染小鼠肺部細(xì)菌載量的增加
    討論
第二部分 SapM通過抑制Mtb感染的巨噬細(xì)胞自噬促進(jìn)結(jié)核分枝桿菌的存活
    前言
    材料與方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
        二. 實(shí)驗(yàn)方法
    結(jié)果
        一. SapM抑制雷帕霉素誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞發(fā)生自噬
        二. SapM有效抑制Ms感染的巨噬細(xì)胞發(fā)生自噬
        三. SapM有效抑制感染Mtb的巨噬細(xì)胞發(fā)生自噬
        四. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn):SapM抑制Ms感染的小鼠肺內(nèi)細(xì)胞發(fā)生自噬
        五. SapM對(duì)巨噬細(xì)胞自噬的抑制始于起始階段
        六. SapM對(duì)巨噬細(xì)胞自噬的抑制作用依賴其磷酸酶活性
    討論
第三部分 SapM通過激活mTOR的活性抑制巨噬細(xì)胞自噬的起始階段
    前言
    材料與方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
        二. 實(shí)驗(yàn)方法
    結(jié)果
        一. SapM可直接結(jié)合自噬起始相關(guān)分子mTOR
        二. SapM通過激活mTOR的活性抑制巨噬細(xì)胞自噬的起始
        三. mTOR結(jié)合SapM的功能域分析
        四. SapM結(jié)合的mTOR功能域分析
    討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄 綜述
    參考文獻(xiàn)
縮略詞
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文及參加學(xué)術(shù)會(huì)議情況
致謝



本文編號(hào)：4029451