發(fā)布時間：2025-02-05 09:46

　　研究背景脂肪組織是人體內胰島素作用的重要靶組織,在胰島素調節(jié)下,脂肪細胞通過甘油三酯的合成與分解,實現(xiàn)能量的存儲和釋放,維持體內能量穩(wěn)態(tài)。肥胖癥的病理改變體現(xiàn)為脂肪細胞的膨大以及脂肪周圍間充質干細胞分化導致的脂肪細胞數(shù)量增多。因此,探索間充質干細胞分化為成熟脂肪細胞的調控因子,對于完善脂肪代謝異常及肥胖的成因及分子機制,提供肥胖癥與脂肪發(fā)育不良的治療新靶點有著重大的意義。長鏈非編碼RNA通過轉錄調控與轉錄后修飾等多種方式廣泛參與人體內各種生理及病理過程。其中,在課題組前期研究中發(fā)現(xiàn),LncRNA-p3134與肥胖關系密切,但其具體效應機制尚不明確。目的觀察比較過表達LncRNA-p3134的3T3-L1細胞系與對照組3T3-L1細胞分化功能及胰島素敏感性差異,探討LncRNA-p3134對脂肪細胞分化及功能的影響。探索LncRNA-p3134產(chǎn)生調控作用的潛在作用位點及機制。方法(1)利用慢病毒轉染技術構建穩(wěn)定表達LncRNA-p3134的3T3-L1細胞系,隨后誘導脂肪前體細胞向成熟脂肪細胞分化,采用油紅O染色及半定量法觀察LncRNA-p3134對脂肪細胞中脂滴大小及形態(tài)的影響,采用...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１轉染４８小時熒光顯微鏡下觀察慢病毒載體感染效率

分化過程中進行檢測，我們采用慢病毒載體，將攜帶ＬｎｃＲＮＡ－Ｐ３１３４表達基因??的慢病毒載體和空載慢病毒載體分別轉染至３Ｔ３－Ｌ１細胞系中，在轉染后第３天??用熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)有綠色熒光蛋白表達，隨后開始使用嘌呤霉素（５Ｈｇ／ｍｌ）??篩選細胞，連續(xù)篩選７天，建立穩(wěn)定表達Ｌｎ....

圖１－２過表達ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４對３Ｔ３－Ｌ１脂肪前體細胞分化的影響

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圖１－３?ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４對脂肪細胞胰島素敏感性的影響

?響。??為了進一步明確ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４引起的脂肪細胞分化功能障礙是否與胰島??素及胰島素信號通路有關，我們采用相同胰島素濃度刺激分化成熟的脂肪細胞，??通過顯色法定量檢測脂肪細胞攝取葡萄糖的能力。結果顯示，空白對照組（未??干預）與陰性對照組（感染空載慢病毒）的３Ｔ３－....

圖１－４?ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４對３Ｔ３－Ｌ１脂肪前體細胞成脂相關轉錄因子表達的影響

?博士學位論文???Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ?Ｒｅｌａｔｅｄ?Ｇｅｎｅ?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ＦＡＢＰ４?—??１＇５１?□?ｎｃ?＿＾ｒ：???〇?鬥?內?ｒ＾ｊ?廣ｊ?Ｏ?□?ｌｎｃＲＮＡ－Ｐ３１３４?ＰＰＡＲｙ?讀??Ｓ?１．０－?Ａ?工?Ｉ?工工????Ｉ?ａ?ｃ／ＥＢＰ....

本文編號：4029644