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蝮蛇毒纖溶酶的分離純化和性質(zhì)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-26 21:27
  目的:從江浙蝮蛇毒中分離純化無出血作用的纖溶酶,研究其理化性質(zhì),分析末端氨基酸序列,為進(jìn)一步獲得cDNA及全序列分析、基因克隆與表達(dá)及臨床應(yīng)用研究奠定基礎(chǔ)。方法:應(yīng)用Sephadex G-75,DEAE Sepharose Cl-6B柱層析分離純化蝮蛇毒纖溶酶,用纖維蛋白平板測纖溶活性、pH對酶活性的影響、抑制劑對酶活性的影響。用PAGE結(jié)合纖維蛋白覆蓋法定位纖溶組分電泳遷移率。SDS-PAGE測定分子量,IEF測定等電點(diǎn),SDS-PAGE分析纖溶酶對纖維蛋白(原)肽鏈水解特異性。用濁度法研究其對人富血小板血漿由ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的影響。發(fā)色底物法測其對底物S-2238、S-2251的Km值。結(jié)果:用PAGE結(jié)合纖維蛋白覆蓋法定位測定江浙蝮蛇毒中至少有電泳遷移率為0.159、0.27、0.508、0.841的四個(gè)纖溶組分。從江浙蝮蛇毒中分離純化到一個(gè)電泳遷移率為0.841,分子量為23.8ku,等電點(diǎn)為4.875,無出血毒性,對熱穩(wěn)定的纖溶酶。EDTA和β-巰基乙醇能抑制其活性并改變其空間結(jié)構(gòu),Cu2+、Co2+也抑制其活性,PMSF、P... 

【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
論 文
    1. 文中主要英文縮寫
    2. 中文摘要、關(guān)鍵詞
    3. 英文摘要、關(guān)鍵詞
    4. 前言
    5. 材料與儀器
    6. 實(shí)驗(yàn)步驟與方法
    7. 結(jié)果
    8. 討論
    9. 結(jié)論
    10. 致謝
    11. 參考文獻(xiàn)
綜 述
    1. 前言
    2. 蛇毒纖維蛋白(原)水解酶
    3. 蛇毒纖溶酶原激活劑
    4. 臨床應(yīng)用與研究
    5. 前景與展望
    6. 參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]眼鏡蛇毒纖維蛋白原溶解因子的純化及理化性質(zhì)的研究[J]. 朱正光,吳曙光.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 1999(05)
[2]五步蛇毒纖溶組分Ⅱ?qū)Υ笫箢i動脈血栓的溶栓作用[J]. 陳家樹,俞勵(lì)平,梁秀霞,梁陸光.  中國藥理學(xué)通報(bào). 1998(05)
[3]蛇毒纖溶酶的體內(nèi)過程及藥物代謝動力學(xué)研究[J]. 沈子龍,汪笑菲,廖志勇,王紅,李曉祥.  中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 1997(02)
[4]蛇毒纖維蛋白原水解酶[J]. 毛建平,孫志賢.  動物學(xué)雜志. 1997(02)
[5]蚓激酶生物活性檢測方法的研究[J]. 郝蘇麗,沈佳.  中國藥事. 1996(06)
[6]尖吻蝮蛇毒纖溶酶的柱層析分離[J]. 雷丹青.  中國生化藥物雜志. 1996(04)
[7]長白蝮蛇毒纖溶組分的純化及理化性質(zhì)的研究[J]. 陳子易,王曉輝,王瑛玨,何寶俊.  中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 1992(05)
[8]短尾蝮蛇毒柱層析分離及酶活性和生理活性的測定[J]. 韋世秀,湯圣希.  廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1991(01)
[9]蛇毒纖維蛋白溶解酶活力的試管定量測定法[J]. 唐紹慶,韋世秀,湯圣希.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 1987(04)
[10]蝮蛇蛇毒類纖溶酶的分離純化及一些特性的研究[J]. 舒雨雁,洪息君,儲開疆,李曼玲,班建東,湯圣希.  廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1987(01)



本文編號:2940480

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