發(fā)布時間：2024-06-07 03:47

　　目的建立表達(dá)寨卡病毒E蛋白或含prM蛋白的G蛋白缺失型重組水皰性口炎病毒(rVSV)載體疫苗,評價其免疫效果。方法選取E蛋白或含prM蛋白基因,分別構(gòu)建入prVSVΔG和prVSV骨架質(zhì)粒,通過反向遺傳學(xué)操作得到2種缺失VSV-G蛋白的重組病毒疫苗(rVSV△G-E、rVSV△G-prM-2A-E)和2種含VSV-G蛋白的重組病毒疫苗(rVSV-E、rVSV-prM-2A-E),免疫BALB/c小鼠后進(jìn)行體液免疫及細(xì)胞免疫水平檢測,比較4種重組病毒疫苗免疫差異。結(jié)果 rVSV△G-prM-2A-E免疫后誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性抗體與rVSV-prM-2A-E免疫后抗體水平相當(dāng)(P>0.05),但顯著高于rVSV△G-E免疫組(P<0.05);rVSV△G-prM-2A-E免疫誘導(dǎo)產(chǎn)生的中和抗體略高于rVSV△G-E和rVSVE免疫組,但低于rVSV-prM-2A-E免疫組;4種重組疫苗免疫后能有效誘導(dǎo)細(xì)胞分泌淋巴細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-2(IL-2)、γ-干擾素(IFN-γ)產(chǎn)生,但誘導(dǎo)產(chǎn)生的IFN-γ水平無顯著差異(P>0.05);rVSV△G-prM-2A-E及rVSV△G-...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 重組骨架載體的構(gòu)建
        1.2.2 重組病毒包裝及擴(kuò)增
        1.2.3 重組病毒鑒定
        1.2.4 重組病毒疫苗免疫小鼠
        1.2.5 小鼠體液免疫和細(xì)胞免疫檢測
        1.2.6 重組病毒疫苗免疫血清的中和抗體測定
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2結(jié)果
    2.1重組骨架載體構(gòu)建及序列鑒定
    2.2重組病毒疫苗包裝及擴(kuò)增
    2.3重組病毒疫苗鑒定
        2.3.1 RT-PCR鑒定重組病毒基因組
        2.3.2重組病毒疫苗中外源蛋白表達(dá)鑒定
        2.3.3間接免疫熒光法檢測病毒蛋白在感染細(xì)胞中的定位
        2.3.4體外生長動力學(xué)實驗
        2.3.5重組病毒疫苗對小鼠體質(zhì)量影響
        2.3.6重組病毒疫苗免疫血清中特異性抗體檢測
        2.3.7細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ檢測
        2.3.8中和抗體檢測
3討論



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