發(fā)布時間：2024-06-30 06:11

　　[研究背景與目的]廣泛纖維化引起的肝硬化是全球的主要死亡原因,當前尚無有效的治療措施。血吸蟲感染是最常見的肝纖維化病因,全世界約2.4億人受累,對人類危害較大是日本血吸蟲和曼氏血吸蟲。我國曾是日本血吸蟲病最流行的國家之一,截至2017年底,仍有晚期血吸蟲病人近3萬例。血吸蟲病的主要危害是蟲卵引起的免疫病理損害,包括肝臟肉芽腫及隨后的纖維化。血吸蟲感染后,成蟲寄生在腸系膜血管,排出的蟲卵隨血流大部分滯留在肝組織中,成熟的蟲卵分泌可溶性抗原(Solubleegg antigen,SEA),引起偏向Th2的免疫反應(yīng),產(chǎn)生的細胞因子和趨化因子,將巨噬細胞(特別是浸潤的、單核細胞來源的巨噬細胞)、T細胞、中性粒細胞和嗜酸性粒細胞招募至蟲卵周圍,并激活肝星狀細胞產(chǎn)生大量的細胞外基質(zhì),包繞蟲卵形成蟲卵性肉芽腫。隨著病程的進展,這些參與免疫反應(yīng)的關(guān)鍵細胞,通過減少炎癥、啟動再生機制進行組織修復(fù),但是雌蟲持續(xù)產(chǎn)卵導(dǎo)致的反復(fù)炎癥及修復(fù),則引起進行性纖維化,最終發(fā)展為肝硬化、肝腹水、消化道出血等嚴重并發(fā)癥,成為晚期血吸蟲病人的主要死因。哺乳動物不育系 20 樣激酶 1(Mammalian sterile l...

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1：哺乳動物細胞中Hippo通路的核心成分改自MaS,etal.TheHippoPathway:BioolgyandPathophysiology.Annu.Rev.Biochem,2019;88:577-604.

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14圖1：哺乳動物細胞中Hippo通路的核心成分改自MaS,etal.TheHippoPathway:BioolgyandPathophysiology.Annu.Rev.Biochem,2019;88:577-604.課題組前期實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)：MST1在正....

圖1.日本血吸蟲感染小鼠肝臟中MST1表達（A）血吸蟲感染后9W、12W肝臟MST1的mRNA水平，***p<0.001相對于正常鼠；（B）血吸蟲感染后6W、12W肝臟MST1蛋白表達

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文37圖1.日本血吸蟲感染小鼠肝臟中MST1表達（A）血吸蟲感染后9W、12W肝臟MST1的mRNA水平，***p<0.001相對于正常鼠；（B）血吸蟲感染后6W、12W肝臟MST1蛋白表達。Fig1.TheexpressionofMST1inliverso....

圖2.條件敲除Mst1的靶向策略及MST1等位基因的PCR鑒定

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文38胞、粒細胞中MST1的表達缺失。通過PCR分別鑒定LoxP位點和Cre的表達（圖2.B），可篩選出巨噬細胞特異性敲除MST1小鼠，基因型為Mst1flox/floxLysM-Cre（即Mst1M/M）。圖2.條件敲除Mst1的靶向策略及MST1等位基因....

圖3.Mst1M/M小鼠和Mst1flox/flox小鼠的基因型鑒定

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文39有LoxP位點，重組的Cre酶，即為巨噬細胞特異性敲除MST1小鼠，如圖3.所示，編號為131、132、135、136即為巨噬細胞特異性敲除MST1的純合子小鼠，我們稱之為Mst1-/-LysM-cre或者Mst1M/M（如圖3.），其中PC為陽性對照....

本文編號：3998503