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凝集素DSA識(shí)別的乙肝相關(guān)肝硬化患者唾液中特異性糖鏈結(jié)構(gòu)的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-07-10 19:08
  研究背景:慢性乙肝是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)引起的,以肝臟炎性病變?yōu)橹鞯囊活惓R娂膊 N覈?guó)是慢性肝炎特別是乙型肝炎(HBV-induced chronic hepatitis,HB)的高流行區(qū),約2%10%的患者可轉(zhuǎn)化為肝硬化(Hepatic Cirrhosis,HC)。目前,HC的各種檢測(cè)方法分別受其技術(shù)特點(diǎn)的限制,分別存在特異性低、取樣不便和不能早期診斷等缺陷。本實(shí)驗(yàn)室在前期研究中采用凝集素芯片檢測(cè)技術(shù),分析了491例HBV誘發(fā)的肝炎、肝硬化和肝癌患者和156例健康志愿者(Healthy Volunteer,HV)的唾液樣本,有14個(gè)凝集素(例如MAL-II,UEA-I和DSA)顯示了它們識(shí)別的唾液糖蛋白糖型在肝病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)生了顯著變化,制備出了一款針對(duì)HBV誘發(fā)的肝病檢測(cè)的小型凝集素芯片,并構(gòu)建了數(shù)學(xué)診斷模型。本研究首先運(yùn)用這款凝集素芯片進(jìn)行盲測(cè),驗(yàn)證數(shù)學(xué)診斷模型的準(zhǔn)確性,并采用唾液芯片和DSA凝集素印跡技術(shù)驗(yàn)證肝病患者唾液中的糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的差異,最后利用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(MALDI-TOF/T...

【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.乙型肝炎病毒Dane顆粒結(jié)構(gòu)示意圖

圖1.乙型肝炎病毒Dane顆粒結(jié)構(gòu)示意圖

西北大學(xué)碩士學(xué)位論文肝炎病毒[10]。HBV也可在孕婦分娩期間從表現(xiàn)出的癥狀主要包括皮膚,眼睛和尿液出[11]。型的DNA病毒,具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性,屬于因型,且地理分布差異較大。HBV病毒有四心抗原HBcAg組成的核衣殼和核心蛋白、蛋白和具有轉(zhuǎn)錄反式激活潛力的聚合酶等。....


圖2.肝病發(fā)展簡(jiǎn)易流程圖

圖2.肝病發(fā)展簡(jiǎn)易流程圖

西北大學(xué)碩士學(xué)位論文Cell)可以誘導(dǎo)MHCI型基因下調(diào)的細(xì)胞和應(yīng)激誘導(dǎo)的配體過表達(dá)細(xì)胞的凋亡。由于細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而導(dǎo)致的肝細(xì)胞纖維化,使得自然殺傷細(xì)胞與腫瘤和星狀細(xì)胞靶標(biāo)分離,細(xì)胞功能降低,腫瘤監(jiān)測(cè)功能失常[22]。雖然幾乎沒有由于家族遺傳而患病的肝癌患者,但已經(jīng)....


圖3.凝集素芯片點(diǎn)樣陣列

圖3.凝集素芯片點(diǎn)樣陣列

完成后用離心機(jī),500rpm,25℃離心10min,離心干燥,最后放入常溫干燥箱中保存。芯片的點(diǎn)制凝集素點(diǎn)樣液依次加入384孔板中,設(shè)計(jì)好凝集素芯片yer48點(diǎn)樣儀進(jìn)行凝集素芯片的點(diǎn)制。針對(duì)HBV誘發(fā)的點(diǎn)樣陣列如圖3所示,陣列中包括內(nèi)參探針PTL-Ⅱ,1EA-....


圖4.肝病患者唾液芯片設(shè)計(jì)示意圖

圖4.肝病患者唾液芯片設(shè)計(jì)示意圖

本的準(zhǔn)備唾液采集前用生理鹽水漱口三次,以確?谇恍l(wèi)生;采集時(shí)舌分泌的唾液樣本至少1mL至離心管,并于冰上暫時(shí)保存;離心機(jī)棄去沉淀,留取清液并測(cè)定蛋白濃度,加入1μL蛋白酶抑制劑性,以保持唾液樣本中蛋白的活性,處理完成后于-80℃冰箱片的設(shè)計(jì)HB,HC和HCC四組樣本....



本文編號(hào):4004592

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