發(fā)布時間：2025-06-10 01:49

　　 為得到羊口瘡病毒(ORFV)B2L蛋白的可能抗原表位及截短后高效表達的表位蛋白,本試驗采用DNAStar、Mega 7.0等軟件對部分NCBI已登錄的B2L基因序列進行分析,并應用不同在線服務器對其編碼蛋白的信號肽、跨膜區(qū)、細胞毒性T細胞表位、輔助性T細胞表位、B細胞表位和二級結(jié)構(gòu)進行預測,同時參考多模板進行三級結(jié)構(gòu)預測,綜合抗原表位、親水性、表面可及性和抗原指數(shù)等主要預測數(shù)據(jù)進行抗原位點分析及融合His·tag抗原表位蛋白的設計,構(gòu)建并原核表達截短后高效表達的表位蛋白。結(jié)果顯示,得到了幾個可能的優(yōu)質(zhì)抗原表位,分別為88-93、133-138、172-175、251-254、311-313和370-377位氨基酸;純化并復性的蛋白以多聚體形式存在;Western blotting結(jié)果顯示,其具有良好的反應原性。該研究確定了ORFV B2L蛋白抗原位點,構(gòu)建并原核表達了截短后高效表達的表位蛋白,為羊口瘡診斷制劑及亞單位疫苗的研究奠定了基礎。

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 ORFV B2L基因核苷酸及氨基酸序列分析
        1.2.2 跨膜區(qū)域及信號肽預測
        1.2.3 B細胞表位預測
        1.2.4 T細胞表位預測
        1.2.5 蛋白二級結(jié)構(gòu)預測
        1.2.6 蛋白三級結(jié)構(gòu)預測
        1.2.7 綜合分析B細胞抗原表位
        1.2.8 重組蛋白的設計與優(yōu)化
        1.2.9 重組蛋白的反應原性鑒定
2 結(jié) 果
    2.1 ORFV B2L同源性分析結(jié)果
    2.2 ORFV B2L跨膜區(qū)域及信號肽預測
    2.3 ORFV B2L B細胞表位預測
    2.4 ORFV B2L T細胞表位預測
    2.5 ORFV B2L蛋白二級結(jié)構(gòu)預測
    2.6 ORFV B2L蛋白三級結(jié)構(gòu)預測
    2.7 ORFV B2L B細胞抗原表位分析
    2.8 ORFV B2L重組蛋白的設計與優(yōu)化
    2.9 重組蛋白的反應原性鑒定結(jié)果
3 討 論
4 結(jié) 論



本文編號：4050132