發(fā)布時(shí)間：2025-06-24 06:55

　　SKAP2,也稱SFK家族激酶相關(guān)磷酸化蛋白2,是非受體蛋白酪氨酸激酶家族中的一員。有研究報(bào)道SKAP2參與調(diào)控細(xì)胞微絲組裝的一系列重要過程,但SKAP2在卵母細(xì)胞成熟過程中的作用機(jī)制仍未闡明。本實(shí)驗(yàn)以小鼠卵母細(xì)胞為研究對(duì)象,探討了 SKAP2在細(xì)胞不對(duì)稱減數(shù)分裂過程中的表達(dá)、定位和相關(guān)調(diào)控機(jī)制。前期結(jié)果表明:在減數(shù)分裂GV、GVBD、MI和MII期,SKAP2均有穩(wěn)定表達(dá)。通過對(duì)處于減數(shù)分裂各個(gè)關(guān)鍵時(shí)期的卵母細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)SKAP2主要定位在卵母細(xì)胞皮質(zhì)邊緣。細(xì)胞松弛素B的干擾處理進(jìn)一步證實(shí)了 SKAP2與微絲在卵母細(xì)胞皮質(zhì)呈現(xiàn)共定位關(guān)系。為了進(jìn)一步探究SKAP2與微絲之間的關(guān)系和作用機(jī)制,我們通過對(duì)卵母細(xì)胞顯微注射特異性SKAP2 siRNA來降低SKAP2蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示SKAP2下調(diào)引起卵母細(xì)胞第一極體排放率下降和胞質(zhì)分裂失敗。細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中的微絲組裝量在下調(diào)SKAP2后也降低了。同時(shí)敲低SKAP2表達(dá)水平還干擾了紡錘體遷移、微絲帽和無(wú)皮質(zhì)顆粒區(qū)的形成,并且影響大多數(shù)卵母細(xì)胞減數(shù)分裂周期。與此同時(shí),ARP2和WAVE2的表達(dá)和定位在SKAP2下調(diào)后也...

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過程示意圖｜Ｕ｜

分裂形成單倍體配子，真正實(shí)現(xiàn)了染色體數(shù)目倍性減半。因此保證了卵母細(xì)??胞正常受精和母源遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定［４］。??卵母細(xì)胞減數(shù)分裂關(guān)鍵時(shí)期如圖１所示，其間涉及卵母細(xì)胞ＤＮＡ、染色體、??細(xì)胞核、細(xì)胞骨架的變化詳細(xì)情況為：??①

圖１．２微絲成核和延長(zhǎng)示意圖｜２７１

?在微絲延長(zhǎng)過程上，ｆｏｒｍｉｎ蛋白和Ａｒｐ２／３復(fù)合體不同，同時(shí)ｆｏｒｍｉｎ蛋白始終與微??絲正極端結(jié)合，不會(huì)產(chǎn)生分支（圖１．２）。??Ａｆｐ２／３?Ａｒｐ２／３?Ｎｕｄｅａｔｉｏｎ??＋?ＮＰＦＳ?ｃｏｍｐｌｅＫ?Ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ?Ｆａｃｔｏｒ?ｆ、??＃?ｗ??Ｒｒｏｆｉ....

圖１．３減數(shù)第一次分裂中期紡錘體遷移和細(xì)胞皮質(zhì)極化｜４４’４５１

當(dāng)紡錘體遷移到細(xì)胞皮質(zhì)后，皮質(zhì)極性形成。細(xì)胞皮質(zhì)極化的典型特征還包??括在微帽區(qū)域聚集的Ｒａｃ－ＧＴＰ、Ｍｙｏｓｉｎ?ＩＩ和Ｃｄｃ４２以及微絲帽的下方無(wú)皮質(zhì)顆??粒區(qū)形成［３５，３６］（圖１．３）。相關(guān)研究報(bào)道，這些遷移到皮質(zhì)的染色質(zhì)介導(dǎo)皮質(zhì)重??組啟動(dòng)，實(shí)驗(yàn)中微絲帽的形成用ＤＮ....

圖１．４減數(shù)第一次分裂中期紡鍵體示意圖｜Ｓ１｜〇Ｆｉｇｕｒｅｌ．４?Ｓｐｉｎｄｌｅ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｍｅｔａｐｈａｓｅ??ｏｆ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｉｏｓｉｓ?Ｉ丨??

?Ｖｅｓｉｃｌｅｓ??Ｐｈｏｓｐｈｏ－ｉｎｙｏｓｉｎ－ＩＩ??圖１．３減數(shù)第一次分裂中期紡錘體遷移和細(xì)胞皮質(zhì)極化｜４４’４５１。Ｆｌｇｕｒｅｌ．３?Ｓｐｉｎｄｌｅ??ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｉｎ?ｍｅｔａｐｈａｓｅ?ｏｆ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｉｏｓｉｓ?Ｉ?ａｎｄ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｐ....

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