發(fā)布時間：2024-10-26 20:56

　　 目的應(yīng)用iTRAQ技術(shù)研究腎陽虛證小鼠睪丸的差異蛋白表達,探討腎陽虛引起雄性不育的機制。方法選用20只6周齡雄性昆明小鼠,隨機分為空白對照組及腎陽虛證組,每組10只,腎陽虛組予氫化可的松25 mg/(kg·d)腹腔注射,空白對照組予生理鹽水0.2 mL/d腹腔注射10 d。提取睪丸總蛋白,利用iTRAQ技術(shù)對兩者進行蛋白質(zhì)組質(zhì)譜檢測,并通過篩選差異蛋白、GO富集以及Pathway信號通路富集等生物信息學(xué)方法分析兩組間小鼠睪丸的差異蛋白表達。結(jié)果與空白對照組相比,腎陽虛組小鼠睪丸表達的差異蛋白共87個,其中27個上調(diào),60個下調(diào);顯著富集于生物過程中"生殖"或"生殖過程"或"精子生成"的差異蛋白18個;主要集中在核糖體通路、PPAR信號通路及鈣離子信號通路中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的活性改變。GO與Pathway共富集于Rps5、Rps19、Rps28、Rpl11、Rplp1、Rplp2核糖體蛋白。結(jié)論腎陽虛證可能通過調(diào)節(jié)核糖體蛋白的表達進而影響細胞增殖、凋亡、分化及信號轉(zhuǎn)導(dǎo),或下調(diào)表達對精子有保護作用的分子,或影響睪丸脂質(zhì)代謝及激素水平,從而引起睪丸中生精細胞的發(fā)育異常,最終導(dǎo)致精子活性改變及男性...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 動物及分組
    1.2 主要試劑與儀器
2 方法
    2.1 模型建立
    2.2 iTRAQ定量分析
    2.3 質(zhì)譜分析及數(shù)據(jù)處理
    2.4 統(tǒng)計學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 腎陽虛組小鼠睪丸差異蛋白定量分析
    3.2 腎陽虛組小鼠睪丸差異蛋白的GO富集分析
    3.3 腎陽虛組小鼠睪丸表達的生殖相關(guān)的差異蛋白分析
    3.4 腎陽虛小鼠睪丸差異蛋白的Pathway信號通路富集分析
4 討論



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