發(fā)布時(shí)間：2024-12-19 02:03

　　霍亂弧菌是霍亂的病原體,廣泛存在于海洋及江河入�？诃h(huán)境中。在惡劣環(huán)境中霍亂弧菌會(huì)以活的非可培養(yǎng)(Viable but non-culturable state, VBNC)狀態(tài)維持生存,此時(shí)常規(guī)分離方法檢測(cè)不到,在環(huán)境條件合適時(shí),VBNC狀態(tài)的霍亂弧菌會(huì)復(fù)蘇為活躍增殖的可培養(yǎng)狀態(tài)。因此,VBNC狀態(tài)是霍亂弧菌的一種應(yīng)激生存方式,會(huì)在霍亂監(jiān)測(cè)中造成漏檢。 本研究在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)霍亂弧菌這一特殊的狀態(tài)進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組及蛋白組的分析,探索霍亂弧菌進(jìn)入此狀態(tài)過程中的生理學(xué)變化。已有研究報(bào)道了VBNC狀態(tài)與常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)的轉(zhuǎn)錄組比較,在本研究中,我們?cè)诘蜏睾腿嗽旌Ｋ畻l件下、對(duì)01群El Tor型霍亂弧菌自實(shí)驗(yàn)室常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)向VBNC狀態(tài)發(fā)展過程中的連續(xù)變化進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組比較。在低溫低營(yíng)養(yǎng)條件下,隨著培養(yǎng)的時(shí)間延長(zhǎng),霍亂弧菌核糖體RNA (rRNA)的斷裂程度也越來越強(qiáng),在VBNC狀態(tài)中,rRNA則主要表現(xiàn)為斷裂小片段形式,提示細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成以及相應(yīng)的生理活動(dòng)變?nèi)�。�?duì)霍亂弧菌進(jìn)入VBNC過程中各時(shí)間點(diǎn)差異轉(zhuǎn)錄基因的比較也顯示了這一特征,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),轉(zhuǎn)錄下調(diào)及沉默的基因數(shù)量增多,提示細(xì)菌逐步關(guān)閉...

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1平板計(jì)數(shù)以及活細(xì)iMi計(jì)數(shù)結(jié)果

在培養(yǎng)過程中我們用兩種方法分別觀察霍亂弧菌可培養(yǎng)細(xì)菌個(gè)數(shù)以及細(xì)胞膜完整的活細(xì)菌數(shù)。圖1-1中A為平板計(jì)數(shù)的結(jié)果，從結(jié)果可以看出隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)逐漸減少，尤其前20天可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)急劇下降，到第20天的時(shí)候可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)從108cfu/mlF降到103cfu/ml，20....

圖1-2為根據(jù)平板計(jì)數(shù)結(jié)果得出的存活率，其中A為對(duì)兩種方法每隔10天

中國(guó)疾病預(yù)防控制中心博上學(xué)位論文2結(jié)果2.1誘導(dǎo)霍亂弧菌進(jìn)入VBNC狀態(tài)在實(shí)驗(yàn)室條件下將霍亂弧菌置與4°C人造海水中避光培養(yǎng)誘導(dǎo)其進(jìn)入VBNC狀態(tài)。在培養(yǎng)過程中我們用兩種方法分別觀察霍亂弧菌可培養(yǎng)細(xì)菌個(gè)數(shù)以及細(xì)胞膜完整的活細(xì)菌數(shù)。圖1-1中A為平板計(jì)數(shù)的結(jié)果，從結(jié)果可以看出隨著培....

圖1-8基因覆蓋度分析

圖1-8基因覆蓋度分析從圖中我們可以看到Oh的樣本90%?100%覆蓋的基因占88%,4h的樣本有一個(gè)明顯下降占71%;24h的樣本比4h的好占85%;3day、7d、20d、70d樣本90%?100%的覆蓋度隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)所占比例越來越低。2.4霍亂弧菌進(jìn)入VBNC過....

圖1-9霍亂弧菌進(jìn)入VBNC過程中表達(dá)基因的統(tǒng)計(jì)

基因上我們就認(rèn)為這個(gè)基因是表達(dá)的�；魜y弧菌進(jìn)入VBNC過程中各時(shí)間點(diǎn)基因表達(dá)的統(tǒng)計(jì)見圖1-9，70day的樣本只有2492個(gè)基因處于轉(zhuǎn)錄狀態(tài)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于前幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)，說明至少有1/3的基因處于沉默狀態(tài)，另外還有很大一部分基因相對(duì)表達(dá)量降低，此時(shí)細(xì)菌進(jìn)入休眠狀態(tài)。20d70d圖1-9....

本文編號(hào)：4017478