發(fā)布時間：2025-02-11 21:04

　　目的：本研究旨在觀察聯(lián)合阻斷CD40-CD154和B7-CD28共刺激通路能否誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫無能細胞，以及無能細胞在體外實驗中是否具有免疫調(diào)節(jié)作用；將其過繼輸注至心臟移植小鼠體內(nèi)能否延長移植物存活時間；并初步探討相關(guān)的免疫學(xué)機制。 方法：1、抗-CD154和抗-CDSO單克隆抗體加入BALB／C（反應(yīng)細胞）和C3H（刺激細胞）的混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLR）體系中誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫無能細胞。將無能細胞或?qū)φ占毎�分別加入新的MLR體系中觀察抑制效果以及抗原特異性。無能細胞中加入刺激抗原或重組小鼠IL-2（rmIL-2），觀察無能細胞的反應(yīng)情況。流式細胞儀檢測無能細胞的表型。2、將供體小鼠的心臟異位移植至受體小鼠腹腔內(nèi)，在Balb／c（H-2^d）、C3H（H-2^k）和C57BL／6（H-2^b）這三種常用的近交系小鼠品系中選擇理想的供、受體組合。3、在體內(nèi)實驗中，所有BALB／C受者小鼠術(shù)前均予以3.0—Gy γ射線照射以適應(yīng)輸注的無能細胞。γ射線照射的BALB／C小鼠在腹腔異位心臟移植術(shù)后即刻經(jīng)腎靜脈注入無能細胞，...

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.3.無能細胞的逆轉(zhuǎn)情況

對照細胞尤能細胞圖1.3.無能細胞的逆轉(zhuǎn)情況1.無能細胞或者對照細胞(無刺激組)2.無能細胞或?qū)φ占毎�加�?0一GyY射線照射的C3H脾細胞培養(yǎng)4天(C3H細胞刺激組)3.無能細胞或?qū)φ占毎�加入IL一2培養(yǎng)2天(IL一2刺激組)4.無能細胞或?qū)φ占毎�加�?0一GyY射線照射的C3....

圖3.3優(yōu)化PCR反應(yīng)的循環(huán)數(shù)

由于無實時熒光定量民R裝置，故只育當先擇半定量PCR，比較目的基因表達差異。首先，引訛咫R反應(yīng)的循環(huán)數(shù)，使反應(yīng)繳七升旨數(shù)增長期，此日書立物濃度與目的基因表達水平高度相關(guān)(圖3.3)。圖3.3優(yōu)化PCR反應(yīng)的循環(huán)數(shù)注:p一actin擴增24個循環(huán)后出現(xiàn)條帶，30個循環(huán)后不再增強，已....

本文編號：4033852