發(fā)布時間：2025-03-19 01:06

　　目的 探究miR-19b和JAK/STAT3信號通路在由IgE介導(dǎo)的過敏性結(jié)膜炎模型中的表達變化;探究阻斷JAK/STAT3信號通路后,在小鼠過敏性結(jié)膜炎的眼表炎癥中的變化;探究miR-19b在TSLP介導(dǎo)的過敏性炎癥及對JAK/STAT3信號通路的影響。方法1.選擇BalB/c雌性小鼠30只,隨機分為正常對照組(PBS)、過敏性結(jié)膜炎組(Allergic conjunctivitis,AC)、CYT387(JAK/STAT3通路阻斷劑)注射過敏性結(jié)膜炎組(AC+CYT387)、miR-19b agomir注射過敏性結(jié)膜炎組(AC+miR-19b)、agomir陰性對照過敏性結(jié)膜炎組(AC+control miR),每組6只小鼠。2.采用結(jié)膜炎眼表臨床評分的方法評估小鼠結(jié)膜炎的嚴重程度,采用HE染色的方法檢測小鼠角結(jié)膜下炎性細胞及嗜酸性粒細胞的浸潤情況,采用ELISA的方法檢測小鼠血清IgE水平,免疫熒光雙染的方法分別檢測小鼠眼表TSLP和p-STAT3在結(jié)膜樹突細胞中的表達情況,采用RT-qPCR的方法分別觀察小鼠角膜、結(jié)膜、淋巴結(jié)組織中miRNA-19b、TSLP及IL-1、IL-5...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、樹突細胞的通過JAK/STAT通路的磷酸化在過敏性結(jié)膜炎發(fā)病機制中的作用研究
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 實驗儀器
        1.1.3 實驗試劑
        1.1.4 溶液配制
    1.2 實驗方法
        1.2.1 動物模型的建立和分組
        1.2.2 臨床評分
        1.2.3 動物處理
        1.2.4 結(jié)膜、角膜、淋巴結(jié)組織取材
        1.2.5 眼球及淋巴結(jié)病理切片的制備
        1.2.6 HE染色
        1.2.7 免疫熒光雙染
        1.2.8 ELISA法
        1.2.9 總RNA的提取
        1.2.10 RT-qPCR
        1.2.11 統(tǒng)計學(xué)方法
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 小鼠臨床評分結(jié)果
        1.3.2 小鼠眼球HE染色結(jié)果
        1.3.3 小鼠血清IgE表達水平
        1.3.4 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測p-STAT3 在樹突細胞中的表達
        1.3.5 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測TSLP在樹突細胞中的表達
        1.3.6 RT-qPCR檢測小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中miR-19b表達水平·
        1.3.7 RT-qPCR分別檢測小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中TSLP及下游促炎因子的表達水平
    1.4 討論
        1.4.1 動物模型的建立
        1.4.2 過敏性結(jié)膜炎中血清IgE因子及阻斷JAK/STAT后的變化
        1.4.3 過敏性結(jié)膜炎中炎癥細胞,TSLP及相關(guān)炎癥因子的變化
        1.4.4 miR-19b在過敏性結(jié)膜炎及阻斷JAK/STAT通路后的變化
        1.4.5 JAK/STAT信號通路的磷酸化與樹突細胞成熟活化
        1.4.6 樹突細胞的成熟在過敏性結(jié)膜炎的機制
    1.5 小結(jié)
二、MiR-19b通過影響TSLP對 JAK/STAT通路的影響研究
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗儀器
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 動物模型的建立和分組
        2.2.2 臨床評分
        2.2.3 動物處理
        2.2.4 結(jié)膜、角膜、淋巴結(jié)組織取材
        2.2.5 眼球及淋巴結(jié)病理切片的制備
        2.2.6 HE染色
        2.2.7 免疫熒光雙染
        2.2.8 ELISA法
        2.2.9 總RNA的提取與RT-PCR
        2.2.10 統(tǒng)計學(xué)方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 小鼠臨床評分結(jié)果
        2.3.2 RT-qPCR檢測小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中mi R-19b表達水平
        2.3.3 小鼠眼球HE染色結(jié)果
        2.3.4 小鼠血清IgE表達水平
        2.3.5 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測p-STAT3 在樹突細胞中的表達
        2.3.6 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測TSLP在樹突細胞中的表達
        2.3.7 RT-qPCR分別檢測小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中TSLP及下游促炎因子的表達水平
    2.4 討論
        2.4.1 動物模型的建立
        2.4.2 炎癥細胞、血清IgE因子及相關(guān)炎癥因子在miR-19b過表達后的變化
        2.4.3 miR-19b后對JAK/STAT通路磷酸化及樹突細胞的影響機制
    2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
發(fā)表論文情況說明
綜述 樹突細胞在過敏性結(jié)膜炎中的作用和抗原提呈機制的研究進展
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：4036456