發(fā)布時(shí)間：2025-03-19 01:06

　　目的 探究miR-19b和JAK/STAT3信號(hào)通路在由IgE介導(dǎo)的過(guò)敏性結(jié)膜炎模型中的表達(dá)變化;探究阻斷JAK/STAT3信號(hào)通路后,在小鼠過(guò)敏性結(jié)膜炎的眼表炎癥中的變化;探究miR-19b在TSLP介導(dǎo)的過(guò)敏性炎癥及對(duì)JAK/STAT3信號(hào)通路的影響。方法1.選擇BalB/c雌性小鼠30只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(PBS)、過(guò)敏性結(jié)膜炎組(Allergic conjunctivitis,AC)、CYT387(JAK/STAT3通路阻斷劑)注射過(guò)敏性結(jié)膜炎組(AC+CYT387)、miR-19b agomir注射過(guò)敏性結(jié)膜炎組(AC+miR-19b)、agomir陰性對(duì)照過(guò)敏性結(jié)膜炎組(AC+control miR),每組6只小鼠。2.采用結(jié)膜炎眼表臨床評(píng)分的方法評(píng)估小鼠結(jié)膜炎的嚴(yán)重程度,采用HE染色的方法檢測(cè)小鼠角結(jié)膜下炎性細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)情況,采用ELISA的方法檢測(cè)小鼠血清IgE水平,免疫熒光雙染的方法分別檢測(cè)小鼠眼表TSLP和p-STAT3在結(jié)膜樹(shù)突細(xì)胞中的表達(dá)情況,采用RT-qPCR的方法分別觀察小鼠角膜、結(jié)膜、淋巴結(jié)組織中miRNA-19b、TSLP及IL-1、IL-5...

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、樹(shù)突細(xì)胞的通過(guò)JAK/STAT通路的磷酸化在過(guò)敏性結(jié)膜炎發(fā)病機(jī)制中的作用研究
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.4 溶液配制
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 動(dòng)物模型的建立和分組
        1.2.2 臨床評(píng)分
        1.2.3 動(dòng)物處理
        1.2.4 結(jié)膜、角膜、淋巴結(jié)組織取材
        1.2.5 眼球及淋巴結(jié)病理切片的制備
        1.2.6 HE染色
        1.2.7 免疫熒光雙染
        1.2.8 ELISA法
        1.2.9 總RNA的提取
        1.2.10 RT-qPCR
        1.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 小鼠臨床評(píng)分結(jié)果
        1.3.2 小鼠眼球HE染色結(jié)果
        1.3.3 小鼠血清IgE表達(dá)水平
        1.3.4 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測(cè)p-STAT3 在樹(shù)突細(xì)胞中的表達(dá)
        1.3.5 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測(cè)TSLP在樹(shù)突細(xì)胞中的表達(dá)
        1.3.6 RT-qPCR檢測(cè)小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中miR-19b表達(dá)水平·
        1.3.7 RT-qPCR分別檢測(cè)小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中TSLP及下游促炎因子的表達(dá)水平
    1.4 討論
        1.4.1 動(dòng)物模型的建立
        1.4.2 過(guò)敏性結(jié)膜炎中血清IgE因子及阻斷JAK/STAT后的變化
        1.4.3 過(guò)敏性結(jié)膜炎中炎癥細(xì)胞,TSLP及相關(guān)炎癥因子的變化
        1.4.4 miR-19b在過(guò)敏性結(jié)膜炎及阻斷JAK/STAT通路后的變化
        1.4.5 JAK/STAT信號(hào)通路的磷酸化與樹(shù)突細(xì)胞成熟活化
        1.4.6 樹(shù)突細(xì)胞的成熟在過(guò)敏性結(jié)膜炎的機(jī)制
    1.5 小結(jié)
二、MiR-19b通過(guò)影響TSLP對(duì) JAK/STAT通路的影響研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 動(dòng)物模型的建立和分組
        2.2.2 臨床評(píng)分
        2.2.3 動(dòng)物處理
        2.2.4 結(jié)膜、角膜、淋巴結(jié)組織取材
        2.2.5 眼球及淋巴結(jié)病理切片的制備
        2.2.6 HE染色
        2.2.7 免疫熒光雙染
        2.2.8 ELISA法
        2.2.9 總RNA的提取與RT-PCR
        2.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 小鼠臨床評(píng)分結(jié)果
        2.3.2 RT-qPCR檢測(cè)小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中mi R-19b表達(dá)水平
        2.3.3 小鼠眼球HE染色結(jié)果
        2.3.4 小鼠血清IgE表達(dá)水平
        2.3.5 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測(cè)p-STAT3 在樹(shù)突細(xì)胞中的表達(dá)
        2.3.6 小鼠眼球免疫熒光雙染檢測(cè)TSLP在樹(shù)突細(xì)胞中的表達(dá)
        2.3.7 RT-qPCR分別檢測(cè)小鼠結(jié)膜、角膜和淋巴結(jié)組織中TSLP及下游促炎因子的表達(dá)水平
    2.4 討論
        2.4.1 動(dòng)物模型的建立
        2.4.2 炎癥細(xì)胞、血清IgE因子及相關(guān)炎癥因子在miR-19b過(guò)表達(dá)后的變化
        2.4.3 miR-19b后對(duì)JAK/STAT通路磷酸化及樹(shù)突細(xì)胞的影響機(jī)制
    2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文情況說(shuō)明
綜述 樹(shù)突細(xì)胞在過(guò)敏性結(jié)膜炎中的作用和抗原提呈機(jī)制的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4036456