發(fā)布時間：2018-04-03 08:12

  本文選題：主動縮窄術(shù)　切入點：心室重構(gòu)　出處：《武漢大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：心室重構(gòu)是心力衰竭發(fā)展的基礎(chǔ)。如何控制、延緩和逆轉(zhuǎn)心室重構(gòu),是治療心力衰竭的關(guān)鍵。丹參素(DSS)是一種水溶性酚性芳香酸類化合物,主要來源于唇形植物丹參和甘西鼠尾草的根。丹參素是一種天然活性產(chǎn)物且具有清除氧自由基、降解過氧化物及抗氧化特性,其抗氧化活性強于維生素C。研究報道丹參素通過其抗氧化特性和心臟保護效應(yīng)抑制異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心室肥厚,顯著降低心臟重量／體重比(HW/BW)和左心室重量/體重比(LVW/BW)。這些研究結(jié)果均提示丹參素具有心臟保護作用。但是,丹參素對壓力負荷后心室重構(gòu)的影響尚未見報道。本研究通過主動脈縮窄術(shù)(TAC)構(gòu)建心室重構(gòu)模型,觀察丹參素對壓力負荷后心功能及心室重構(gòu)的影響,并探討其機制。第一部分丹參素對壓力負荷后小鼠心功能及心室重構(gòu)的影響目的：探討丹參素對壓力負荷后小鼠心功能及心室重構(gòu)的影響。方法：將C57BL/6雄性小鼠隨機分成Sham-Saline組、Sham-DSS組、PAC-Saline組和TAC-DSS組,通過主動脈縮窄術(shù)制備小鼠心室重構(gòu)模型,術(shù)后根據(jù)分組給予不同處理8周。心臟超聲檢測心臟結(jié)構(gòu)和心臟功能;心臟超聲后處死小鼠,留取心臟組織標本。觀察各組小鼠心率(HR)、體重(BW)、肺臟重量/體重比(LW/BW)、心臟重量/體重比(HW/BW)和心臟重量/脛骨長度比(HW/TL);RT-PCR檢測ANP(心房鈉尿肽)、BNP(B型利鈉肽)、β-MHC(β-肌球蛋白重鏈)和α-MHC(α-肌球蛋白重鏈)的表達；HE染色觀察各組小鼠心臟體積和心肌細胞橫截面積。結(jié)果：(1)各組小鼠HR和BW之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；(2)TAC-Saline組小鼠LW/BW、HW/BW和HW/TL均高于Sham-Saline組(p0.05),而TAC-DSS組較TAC-Saline組降低(p0.05);(3)與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組的心功能減退和心室腔增大(p0.05),AC-DSS組心臟超聲指標優(yōu)于TAC-Saline組(p0.05);(4)RT-PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn),相比Sham-Saline組,TAC-Saline組ANP、BNP、β-MHC mRNA的表達增加(p0.05)和α-MHC mRNA的表達降低(p0.05)；而TAC-DSS組較TAC-Saline組ANP、BNP、β-MHC mRNA的表達降低(p0.05)和α-MHC mRNA的表達升高(p0.05)；(5)HE染色顯示主動脈縮窄術(shù)后心臟體積和心肌細胞橫截面積增大,而丹參素能夠降低主動脈縮窄術(shù)引起的心臟體積和心肌細胞橫截面積的增大。結(jié)論：丹參素干預(yù)可改善壓力負荷后小鼠的心功能和心室重構(gòu)。第二部分丹參素對壓力負荷后小鼠心室重構(gòu)時氧化應(yīng)激、心肌細胞凋亡和心肌纖維化的影響及作用機制的研究目的：探討丹參素對壓力負荷后小鼠心室重構(gòu)時氧化應(yīng)激、心肌細胞凋亡和心肌纖維化的影響及作用機制的研究。方法：將C57BL/6雄性小鼠隨機分成Sham-Saline組、Sham-DSS組、TAC-Saline組和TAC-DSS組,通過主動脈縮窄術(shù)制備小鼠心室重構(gòu)模型,術(shù)后根據(jù)分組給予不同處理8周。心臟超聲后處死小鼠,留取心臟組織標本。(1)TUNEL染色檢測各組小鼠心肌細胞凋亡情況和DCFH-DA檢測心肌細胞內(nèi)ROS水平,Western blot檢測Caspase-3、Bax和Bcl-2凋亡相關(guān)蛋白表達；(2)Western blot檢測Nrf2、HO-1、NQO-1和y-GCS的蛋白表達；(3)RT-PCR檢測結(jié)締組織生長因子(CTGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達；(4)Western blot檢測TGF-β1/Smad信號通路相關(guān)蛋白表達；(5)Masson染色檢測心肌纖維化程度。結(jié)果：(1)TUNEL染色發(fā)現(xiàn),與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組心肌細胞凋亡增加(p0.05),TAC-DSS組心肌細胞凋亡低于TAC-Saline組(p0.05)；與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組心肌組織中的ROS水平升高(p0.05),而TAC-DSS組心肌組織中的ROS水平低于TAC-Saline組(p0.05)：與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組Bax和Caspase-3蛋白表達升高(p0.05),而TAC-DSS組較TAC-Saline組的Caspase-3和Bax蛋白表達減少(p0.05),各組Bcl-2蛋白表達之間無差異;(2)與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組Nrf2和HO-1蛋白表達升高(p0.05),NQO-1和γ-GCS蛋白表達下降(p0.05),而TAC-DSS組Nrf2、HO-1、NQO-1和y-GCS蛋白表達均高于TAC-Saline組(p0.05);(3)與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組TGF-β1、CTGF、Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達升高(p0.05),而TAC-DSS組TGF-β1、 CTGF、Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達低于TAC-Saline組(p0.05);(4)與Sham-Saline組比較,TAC-Saline組Smad2和Smad3磷酸化水平升高(p0.05)、TGF-β1蛋白表達增加(p0.05)和Smad7蛋白表達下降(p0.05)；而TAC-DSS組較TAC-Saline組的Smad2和Smad3磷酸化水平降低(p0.05)、TGF-β1蛋白表達減少(p0.05)和Smad7蛋白表達升高(p0.05)；(5)Masson染色提示主動脈縮窄術(shù)后心肌纖維化程度增加,而丹參素能夠降低主動脈縮窄術(shù)所致的心肌纖維化。結(jié)論：丹參素可降低壓力負荷引起的心肌細胞凋亡、氧化應(yīng)激和心肌纖維化。
[Abstract]:The effects of danshensu on cardiac function and ventricular remodeling in mice after pressure loading were studied . The effects of danshensu on cardiac function and ventricular remodeling in rats after pressure loading were studied .
Results : ( 1 ) There was no significant difference between HR and BW ( p < 0.05 ) .
( 4 ) Compared with Sham - Saline group , the expression of ANP , BNP , 尾 - MHC mRNA in TAC - Saline group was increased ( p . 05 ) and the expression of 偽 - MHC mRNA decreased ( p . 05 ) .
Compared with TAC - Saline group , the expression of ANP , BNP , 尾 - MHC mRNA and the expression of 偽 - MHC mRNA in TAC - DSS group increased ( p < 0.05 ) .
Objective : To study the effects of danshensu on myocardial cell apoptosis and myocardial fibrosis in mice after pressure loading .
( 2 ) Western blot was used to detect protein expression of Nrf2 , HO - 1 , NQO - 1 and y - GCS ;
( 3 ) RT - PCR was used to detect the expression of connective tissue growth factor ( ctgf ) , transforming growth factor - beta1 ( TGF - 尾1 ) , type 鈪，

本文編號：1704344