SIRT1通過NF-κB信號通路對HCAEC炎癥反應(yīng)的影響及機制的研究
發(fā)布時間：2020-12-16 11:45
目的:本研究采用ox-LDL誘導(dǎo)HCAEC損傷,建立動脈粥樣硬化細胞模型,探討SIRT1對動脈粥樣硬化中炎癥的影響及可能機制。方法:1.Sirt1基因表達的驗證。取對數(shù)生長期HCAEC,分為正常對照組、空質(zhì)粒對照組、空質(zhì)粒+ox-LDL組、Sirt1過表達+ox-LDL組、Sirt1干擾+ox-LDL組,PDTC（NF-κB阻滯）+Sirt1干擾+ox-LDL組。利用Lipofectamine 2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染人冠狀動脈內(nèi)皮細胞株24h后加入ox-LDL繼續(xù)培養(yǎng)24h,熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染情況;應(yīng)用RT-PCR檢測細胞中Sirt1的mRNA水平;Western blot方法檢測細胞中SIRT1的蛋白表達水平。2.研究SIRT1對HCEAC炎癥反應(yīng)的影響。取對數(shù)生長期HCAEC,分為正常對照組、空質(zhì)粒對照組、空質(zhì)粒+ox-LDL組、Sirt1過表達+ox-LDL組、Sirt1干擾+ox-LDL組。應(yīng)用RT-PCR檢測ICAM-1的mRNA水平;Western blot方法檢測細胞中ICAM-1蛋白表達水平;ELISA法檢測各組IL-1、hs-CRP的表達。3.探討SIRT1發(fā)揮抗...
【文章來源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
-1MTT檢測24h不同濃度ox-LDL對HCAEC存活率的影響
圖 3-1-2-1 各組 ICAM-1 mRNA 相對表達量注： ***p＜0.001，****p＜0.0001。n blot 檢測 ICAM-1 的蛋白表達常對照組、PBS 組、25μg/ml ox-LDL 組、50μg/ml 序上樣檢測，結(jié)果如圖 3-1-2-2-1。析結(jié)果顯示：25μg/ml ox-LDL 組（0.401±0.012）ICA04±0.005）比較，未見顯著性差異；隨著 ox-LDL 濃度.527±0.006）、100μg/ml ox-LDL 組（0.724±0.008）I比顯著升高（p<0.05），100μg/ml ox-LDL 組升高）與正常對照組未見明顯差異，見圖 3-1-2-2-2。
內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文（2019） 表 3-1-2-3 細胞上清液中炎癥因子的比較（pg/ml）Table 3-1-2-3 Comparison of inflammatory factors in cell supernatant (pg/ml)組別 n IL-1 hs-CRP正常對照組 3 1.621±0.061 1.663±0.045PBS 組 3 1.602±0.039 1.656±0.05725μg / ml ox-LDL 組 3 1.646±0.046 1.848±0.12650μg / ml ox-LDL 組 3 1.731±0.034 4.511±0.139****100μg / ml ox-LDL 組 3 2.889±0.113**** 7.366±0.240****注：****p<0.0001
【參考文獻】：
期刊論文
[1]血管內(nèi)皮細胞衰老與心血管疾病的相關(guān)性[J]. 卿即娜,陳紅陽,尹琳潔,尹凱. 中國動脈硬化雜志. 2019(02)
[2]動脈粥樣硬化分子影像研究進展[J]. 牟雅琳,陳笑梅,劉旋,劉剛. 影像科學(xué)與光化學(xué). 2019(01)
[3]SIRT1及相關(guān)因子在抗結(jié)核藥物致人肝細胞損傷中的作用[J]. 張一楊,李瑩淑,李金鳳,李標(biāo),崇英之,鄭國穎,孫淑豐,馮福民. 重慶醫(yī)學(xué). 2018(31)
[4]關(guān)注免疫炎癥及其標(biāo)志物在動脈硬化性心血管病中的作用[J]. 程仕彤,王綠婭. 心肺血管病雜志. 2018(10)
[5]Ox-LDL在動脈粥樣硬化中的致病機制及檢測方法研究進展[J]. 張強,徐立. 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2018(19)
[6]SIRT1去乙酰化修飾p53抑制IL-1β介導(dǎo)的軟骨終板細胞衰老[J]. 周年,胡偵明,林鑫,郝杰. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2018(22)
[7]氧化低密度脂蛋白可影響內(nèi)皮祖細胞的功能:如何提高其數(shù)量和功能?[J]. 王鳳嬌,高翔,尹航,陳麗,秦樹存,楊娜娜. 中國組織工程研究. 2018(29)
[8]Sirt家族與腸道疾病[J]. 林思睿,張群,吳巧鳳. 世界華人消化雜志. 2018(20)
[9]SIRT家族成員對腫瘤惡性演進的調(diào)控作用[J]. 錢美佳,胡燕,朱虹,何俏軍,楊波. 藥學(xué)學(xué)報. 2018(08)
[10]SIRT1免疫調(diào)節(jié)功能與免疫相關(guān)性疾病關(guān)系的研究進展[J]. 劉海春,徐向平. 山東醫(yī)藥. 2018(25)
碩士論文
[1]高糖環(huán)境下Sirt1通過P38-MAPK影響小鼠足細胞中TTP及炎癥因子的表達[D]. 于海霞.鄭州大學(xué) 2017
[2]芍藥苷對ox-LDL致內(nèi)皮細胞損傷的干預(yù)作用[D]. 翟小菊.河南大學(xué) 2012
本文編號：2920084
【文章來源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
-1MTT檢測24h不同濃度ox-LDL對HCAEC存活率的影響
圖 3-1-2-1 各組 ICAM-1 mRNA 相對表達量注： ***p＜0.001，****p＜0.0001。n blot 檢測 ICAM-1 的蛋白表達常對照組、PBS 組、25μg/ml ox-LDL 組、50μg/ml 序上樣檢測，結(jié)果如圖 3-1-2-2-1。析結(jié)果顯示：25μg/ml ox-LDL 組（0.401±0.012）ICA04±0.005）比較，未見顯著性差異；隨著 ox-LDL 濃度.527±0.006）、100μg/ml ox-LDL 組（0.724±0.008）I比顯著升高（p<0.05），100μg/ml ox-LDL 組升高）與正常對照組未見明顯差異，見圖 3-1-2-2-2。
內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文（2019） 表 3-1-2-3 細胞上清液中炎癥因子的比較（pg/ml）Table 3-1-2-3 Comparison of inflammatory factors in cell supernatant (pg/ml)組別 n IL-1 hs-CRP正常對照組 3 1.621±0.061 1.663±0.045PBS 組 3 1.602±0.039 1.656±0.05725μg / ml ox-LDL 組 3 1.646±0.046 1.848±0.12650μg / ml ox-LDL 組 3 1.731±0.034 4.511±0.139****100μg / ml ox-LDL 組 3 2.889±0.113**** 7.366±0.240****注：****p<0.0001
【參考文獻】：
期刊論文
[1]血管內(nèi)皮細胞衰老與心血管疾病的相關(guān)性[J]. 卿即娜,陳紅陽,尹琳潔,尹凱. 中國動脈硬化雜志. 2019(02)
[2]動脈粥樣硬化分子影像研究進展[J]. 牟雅琳,陳笑梅,劉旋,劉剛. 影像科學(xué)與光化學(xué). 2019(01)
[3]SIRT1及相關(guān)因子在抗結(jié)核藥物致人肝細胞損傷中的作用[J]. 張一楊,李瑩淑,李金鳳,李標(biāo),崇英之,鄭國穎,孫淑豐,馮福民. 重慶醫(yī)學(xué). 2018(31)
[4]關(guān)注免疫炎癥及其標(biāo)志物在動脈硬化性心血管病中的作用[J]. 程仕彤,王綠婭. 心肺血管病雜志. 2018(10)
[5]Ox-LDL在動脈粥樣硬化中的致病機制及檢測方法研究進展[J]. 張強,徐立. 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2018(19)
[6]SIRT1去乙酰化修飾p53抑制IL-1β介導(dǎo)的軟骨終板細胞衰老[J]. 周年,胡偵明,林鑫,郝杰. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2018(22)
[7]氧化低密度脂蛋白可影響內(nèi)皮祖細胞的功能:如何提高其數(shù)量和功能?[J]. 王鳳嬌,高翔,尹航,陳麗,秦樹存,楊娜娜. 中國組織工程研究. 2018(29)
[8]Sirt家族與腸道疾病[J]. 林思睿,張群,吳巧鳳. 世界華人消化雜志. 2018(20)
[9]SIRT家族成員對腫瘤惡性演進的調(diào)控作用[J]. 錢美佳,胡燕,朱虹,何俏軍,楊波. 藥學(xué)學(xué)報. 2018(08)
[10]SIRT1免疫調(diào)節(jié)功能與免疫相關(guān)性疾病關(guān)系的研究進展[J]. 劉海春,徐向平. 山東醫(yī)藥. 2018(25)
碩士論文
[1]高糖環(huán)境下Sirt1通過P38-MAPK影響小鼠足細胞中TTP及炎癥因子的表達[D]. 于海霞.鄭州大學(xué) 2017
[2]芍藥苷對ox-LDL致內(nèi)皮細胞損傷的干預(yù)作用[D]. 翟小菊.河南大學(xué) 2012
本文編號：2920084
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