發(fā)布時間：2025-03-26 18:23

　　研究目的心血管疾病,尤其是急性心肌梗塞(AMI)會嚴(yán)重影響人們的健康。動脈粥樣硬化是血管內(nèi)斑塊形成的基本病理過程。然而,目前臨床上仍未有有效檢測動脈粥樣硬化斑塊的非侵入性診斷方法。我假設(shè)抗動脈粥樣硬化單鏈抗體偶聯(lián)NaNdF4@NaGdF4納米顆粒可以成為臨床檢測動脈粥樣硬化斑塊的非侵入性的診斷方法,以此進行單鏈抗體的篩選表征和納米顆粒的合成及偶聯(lián)。研究方法我從青島大學(xué)附屬醫(yī)院急診科收集了50例經(jīng)冠脈造影術(shù)明確診斷的動脈粥樣硬化患者的外周動脈血,并提取了其總RNA,以此建立了抗體基因庫和抗體噬菌體庫。我從青島大學(xué)附屬醫(yī)院血管外科收集了動脈粥樣硬化的組織樣本用于噬菌體淘選。我利用噬菌體酶聯(lián)免疫吸附對抗體噬菌體庫進行了6輪淘選,利用E.coil TOP10大腸桿菌進行體外表達,并通過酶聯(lián)免疫吸附和蛋白免疫印記驗證篩選的單鏈抗體對動脈粥樣硬化的特異性和親和力。隨后我合成了NaNdF4@NaGdF4納米顆粒,并利用EDC-NHS反應(yīng)將納米顆粒和單鏈抗體進行歐聯(lián)進而合成雙模態(tài)靶向生物探針,并通過動態(tài)光散射和電鏡分析偶聯(lián)探針的溶液分散度和大小。最后利用ApoE基因敲除小鼠構(gòu)建動脈粥樣硬化動物模型,進而...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1、樣本收集與RNA提取
    2、單鏈抗體基因文庫的構(gòu)建
    3、ScFv噬菌體文庫的構(gòu)建
    4、ASA6 scFv的表達和純化
    5、蛋白免疫印跡和SDS-PAGE及考馬斯亮藍染色
    6、免疫熒光和油紅O染色
    7、ASA6的表征
    8、NaNdF4@NaGdF4 納米納米的合成
    9、通過EDC-NHS反應(yīng)合成ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米顆粒探針。
    10、動物模型制備
    11、經(jīng)近紅外光譜探測小鼠動脈粥樣硬化斑塊
    12、經(jīng)核磁共振探測小鼠體內(nèi)動脈粥樣硬化斑塊
    13、統(tǒng)計分析
結(jié)果
    1、ScFv文庫的構(gòu)建
    2、靶向動脈粥樣硬化斑塊的ScFv的篩選和鑒定
    3、ASA6的表達、純化和鑒定
    4、ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米顆粒探針的合成與表征
    5、ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米粒子探針對動脈粥樣硬化斑塊進行近紅外光譜檢測
    6、ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米顆粒探針對動脈粥樣硬化斑塊的核磁共振成像
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號：4037622